1、黃芪作為常用的中草藥，它是豆科多年生草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的根，有托瘡生肌、利尿排毒、利水消腫和補(bǔ)氣固表等功效。黃芪多糖作為黃芪中的主要有效成分，具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、免疫調(diào)節(jié)和保肝、護(hù)肝等作用，目前在臨床上已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用。
　　 腫瘤免疫逃逸，促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移，是腫瘤沒(méi)有較好療效的一個(gè)原因。髓樣抑制細(xì)胞是腫瘤組織中聚集著的一群表面標(biāo)志為Gr-1+CD11b+的異質(zhì)細(xì)胞，是引起免疫逃逸的

2、重要細(xì)胞群體。抑制機(jī)體髓樣抑制細(xì)胞的生成，進(jìn)而減輕腫瘤所產(chǎn)生的免疫逃逸現(xiàn)象，目前已經(jīng)成為了腫瘤治療的新方向。由于對(duì)黃芪多糖抗腫瘤免疫機(jī)制的研究主要涉及:巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞等方面，但對(duì)髓樣抑制細(xì)胞方面的研究較少。為此，本論文以B16-F10荷瘤鼠作為研究對(duì)象，探討黃芪多糖對(duì)B16-F10荷瘤鼠髓樣抑制細(xì)胞的影響及其抗免疫耐受分子機(jī)制，為黃芪多糖的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制提供新的依據(jù)。具體工作內(nèi)容如下:
　　

3、 1.建立B16-F10荷瘤鼠模型，通過(guò)檢測(cè)B16-F10荷瘤鼠的腫瘤體積變化和抑瘤率，觀察黃芪多糖的體內(nèi)抑瘤作用;并利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟中Gr-1＋CD11b＋髓樣抑制細(xì)胞比例，觀察黃芪多糖對(duì)B16-F10荷瘤鼠髓樣抑制細(xì)胞的影響;同時(shí)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例、酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中IL-10、TGF-β、VEGF、IFN-γ和TNF-α的分泌水平，研究黃芪多糖對(duì)髓樣抑制細(xì)胞的抗免疫耐受分子機(jī)制。結(jié)果顯示:造模第

4、六天，與模型組相比，黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量＋CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量＋CTX組的腫瘤被顯著抑制(P＜0.01)。造模第六天、第八天、第十天和第十二天，與CTX組相比，黃芪多糖低劑量+CTX組和黃芪多糖高劑量+CTX組的腫瘤均被顯著抑制(P＜0.01)。CTX組、黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量+CTX組的抑瘤率分別為:53.82％、35.26％、71.42％、49.

5、82％、78.89％。與模型組相比，CTX、黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+CTX組、黃芪多糖高劑量組和黃芪多糖高劑量+CTX組均可以降低脾臟Gr-1+CD11b+髓樣抑制細(xì)胞比例(P＜0.01)，此外CTX組、黃芪多糖低劑量、黃芪多糖低劑量+CTX、黃芪多糖高劑量和黃芪多糖高劑量+CTX組的荷瘤鼠脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例顯著下降(P＜0.01)，血清中IL-10、TGF-β和VEGF分泌水平也顯著下降(P＜0.01)，同時(shí)，IFN-Υ

6、和TNF-α分泌水平顯著提升(P＜0.05，P＜0.01)。
　　 2.建立B16-F10荷瘤鼠模型，通過(guò)B16-F10荷瘤鼠的體重變化、脾指數(shù)和生化指標(biāo)，觀察黃芪多糖與CTX聯(lián)合治療對(duì)CTX的增效減毒作用。結(jié)果顯示:造模后第六天，與正常組相比，CTX組體重下降(P＜0.05)，但黃芪多糖治療組無(wú)顯著差異;與CTX組相比，黃芪多糖低劑量和黃芪多糖高劑量組的荷瘤鼠的脾指數(shù)顯著升高（P＜0.01）;黃芪多糖低劑量組、黃芪多糖低劑量+