1、綠盲蝽Apolygus lucorum Meyer-Dür和中黑盲蝽Adelphocoris suturalis Jakovlev同屬異翅亞目(Heteroptera)盲蝽科(Miridae)，是我國(guó)棉花重要害蟲(chóng)棉盲蝽中的兩個(gè)主要種類(lèi)。在Bt棉推廣種植之前，棉盲蝽在棉田處于次要害蟲(chóng)地位，一般作為棉鈴蟲(chóng)化學(xué)防治的兼治對(duì)象。但是隨著B(niǎo)t棉的大規(guī)模種植，主要靶標(biāo)害蟲(chóng)棉鈴蟲(chóng)得到了較好的控制，棉田的化學(xué)防治模式發(fā)生了改變，棉田各害蟲(chóng)種群的生態(tài)位隨

2、之發(fā)生了變化，棉盲蝽在棉田由次要害蟲(chóng)上升為主要害蟲(chóng)，不僅危害棉花甚至波及周邊其它的作物。但當(dāng)前控制盲蝽為害的主要手段仍然是化學(xué)防治，其帶來(lái)的后續(xù)問(wèn)題如抗藥性及環(huán)境污染等也很突出。如何有效合理防控棉盲蝽的危害，是當(dāng)前棉花害蟲(chóng)治理的重要課題。
　　Cry51Aa1是從Bt菌株F14-1中分離得到的一種新的殺蟲(chóng)晶體蛋白，其晶體結(jié)構(gòu)與傳統(tǒng)的三結(jié)構(gòu)域型Cry毒素不同，屬氣單胞溶菌素型β穿孔蛋白(aerolysin-typeβ-pore-fo

3、rming toxin，aerolysin-typeβ-PFT)，研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)鞘翅目的馬鈴薯甲蟲(chóng)(Leptinotarsa decemlineata)有殺蟲(chóng)活性，而與此毒素基因序列相似的Cry51Aa2不僅對(duì)馬鈴薯甲蟲(chóng)，同樣還對(duì)豆莢草盲蝽（Lygus hesperus）和美洲牧草盲蝽(Lyguslineolaris)有殺蟲(chóng)活性。本文以綠盲蝽和中黑盲蝽作為對(duì)象，研究了Cry51Aa1對(duì)兩種盲蝽的毒力及對(duì)這兩種害蟲(chóng)若蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育和成蟲(chóng)體內(nèi)部分

4、蛋白酶活力的影響，評(píng)價(jià)了這個(gè)毒素蛋白對(duì)這兩種盲蝽的毒殺效應(yīng)。相關(guān)研究結(jié)果證實(shí)了Cry51Aa1對(duì)盲蝽具有較高的殺蟲(chóng)活性，拓寬了這個(gè)毒素蛋白的殺蟲(chóng)譜，為其今后在防治盲蝽領(lǐng)域的應(yīng)用提供了可能。
　　1.Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽的毒力
　　為了評(píng)價(jià)Bt毒素蛋白Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽的毒力，采用毒素蛋白與人工飼料混合的方法進(jìn)行了對(duì)兩種盲蝽初孵若蟲(chóng)的室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)，并比較了其它Bt毒素蛋白和常用化學(xué)殺蟲(chóng)劑對(duì)這兩

5、種盲蝽的毒力。結(jié)果表明，Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽初孵若蟲(chóng)的LC50分別為10.461μg·mL-1和9.643μg·mL-1，相同濃度下Bt毒素蛋白Cry2Ab和Cry1Ac的致死率顯著低于Cry51Aa1。與其他目前常用殺蟲(chóng)劑的毒力進(jìn)行比較可以看出，Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽初孵若蟲(chóng)的毒力略低于阿維菌素(LC50=8.793μg·mL-1)，但均高于吡蟲(chóng)啉（LC50=18.156μg·mL-1）和高效氯氰菊酯（LC50=26.

6、372μg·mL-1）;對(duì)中黑盲蝽初孵若蟲(chóng)的毒力則是略低于高效氯氰菊酯(LC50=6.455μg·mL-1)，但都高于阿維菌素(LC50=18.964μg·mL-1)和吡蟲(chóng)啉(LC50=29.377μg·mL-1)。表明Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽具有殺蟲(chóng)活性，且在室內(nèi)環(huán)境下，其對(duì)這兩種盲蝽的殺蟲(chóng)效果明顯，甚至高過(guò)目前生產(chǎn)上常用的化學(xué)殺蟲(chóng)劑。
　　2.取食低濃度Cry51Aa1對(duì)兩種盲蝽若蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響
　　本研究對(duì)

7、綠盲蝽和中黑盲蝽若蟲(chóng)從初孵到羽化全程喂食含低濃度(LC10)Cry51Aa1毒素蛋白的人工飼料，觀察取食低濃度毒素對(duì)盲蝽若蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響。結(jié)果表明，取食低濃度Cry51Aa1對(duì)盲蝽若蟲(chóng)的各齡發(fā)育歷期、若蟲(chóng)存活率、成蟲(chóng)羽化率和成蟲(chóng)重量等參數(shù)與正常飼料飼養(yǎng)的試蟲(chóng)相比沒(méi)有顯著差異，但若蟲(chóng)總體發(fā)育時(shí)間有所延長(zhǎng)，增加0.5天左右，且統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異。上述結(jié)果說(shuō)明取食低濃度的Cry51Aa1對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽的生長(zhǎng)發(fā)育影響不大。
　　3.諏食

8、含Cry51Aa1的人工飼料對(duì)盲蝽成蟲(chóng)體內(nèi)部分蛋白酶活性的影響
　　本研究還測(cè)定了若蟲(chóng)期全程取食含低濃度(LC10)Cry51Aa1毒素人工飼料的綠盲蝽和中黑盲蝽成蟲(chóng)體內(nèi)類(lèi)胰蛋白酶、類(lèi)胰凝乳蛋白酶和氨肽酶的活力。與對(duì)照試蟲(chóng)相比，綠盲蝽成蟲(chóng)體內(nèi)的類(lèi)胰蛋白酶活性變化不大，其余2種酶的活性都只有對(duì)照的一半甚至曼低;中黑盲蝽成蟲(chóng)體內(nèi)的類(lèi)胰蛋白酶、類(lèi)凝乳蛋白酶和氨肽酶的酶活性均顯著低于對(duì)照。表明取食低濃度的Cry51Aa1會(huì)明顯降低這3種與

9、盲蝽體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收及一些生理活動(dòng)有關(guān)的蛋白酶的活性。
　　4.Cry51Aa1與Cry2Ab對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽的聯(lián)合作用研究
　　為了探究Bt毒素蛋白Cry51Aa1與其他毒素蛋白之間是否有一定的互作，本研究開(kāi)展了Cry51Aa1與Cry2Ab對(duì)綠盲蝽和中黑盲蝽聯(lián)合作用的毒力測(cè)定。根據(jù)兩種毒素獨(dú)立和不同濃度組合時(shí)對(duì)這兩種盲蝽的生物測(cè)定結(jié)果，將實(shí)際校正死亡率與預(yù)計(jì)校正死亡率相比較，25對(duì)不同濃度組合的處理中，兩個(gè)毒素蛋