1、抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神障礙性疾病，臨床表現(xiàn)復(fù)雜，但由于其發(fā)病誘因較多，發(fā)病機(jī)理還未得到明確的闡釋。流行病學(xué)調(diào)查揭示，抑郁癥患者不僅表現(xiàn)出心理障礙，多數(shù)還伴有腸易激綜合癥和功能性消化不良等胃腸功能障礙，然而，現(xiàn)有基于神經(jīng)遞質(zhì)的理論假說(shuō)并不能夠解釋這種現(xiàn)象。為闡明抑郁癥的發(fā)病機(jī)理，尋找新思路和新方法成為迫切需要解決的問(wèn)題。而作為機(jī)體重要的環(huán)境因子，腸道菌群在胃腸功能方面發(fā)揮著重要作用，已成為國(guó)際上研究疾病的新熱點(diǎn)。因此，本論文從腸道菌群的角

2、度探討其與抑郁癥發(fā)生的關(guān)系。
　　本論文重點(diǎn)圍繞抑郁狀態(tài)下的腸道菌群開(kāi)展以下研究:①通過(guò)慢性溫和性不可預(yù)知應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)結(jié)合孤養(yǎng)的方法，建立CUMS抑郁模型，并采用體重、行為學(xué)指標(biāo)、糖水偏愛(ài)率等參數(shù)，評(píng)價(jià)模型是否復(fù)制成功;②通過(guò)優(yōu)化腸道菌群樣品前處理方法、基因組DNA提取方法和ERIC-PCR擴(kuò)增條件，建立適于分析腸道菌群的ERIC-PCR方法，比較腸道不同部位

3、的菌群多態(tài)性，篩選合適的研究部位，并分析CUMS抑郁模型及藥物干預(yù)后該部位菌群結(jié)構(gòu)是否發(fā)生改變;③通過(guò)優(yōu)化16S rDNA PCR擴(kuò)增條件，建立適于分析上述部位菌群的PCR-DGGE指紋圖譜，回收CUMS抑郁模型及藥物干預(yù)后有差異的條帶，通過(guò)序列測(cè)定技術(shù)和數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，尋找并鑒定引起差異的菌種;④采用常規(guī)石蠟法和RT-PCR技術(shù)，分析CUMS抑郁模型及藥物干預(yù)后腸組織形態(tài)學(xué)特征及炎癥應(yīng)答;⑤采用GC-MS技術(shù)，比較CUMS抑郁模型及藥物干

4、預(yù)后腸組織化學(xué)成分的變化。
　　結(jié)果表明:①與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠體重顯著降低、行為學(xué)數(shù)據(jù)顯著改變以及糖水偏愛(ài)率顯著降低，說(shuō)明CUMS抑郁模型成功復(fù)制;且逍遙散和鹽酸氟西汀具有顯著的抗抑郁效果。此外，模型組大鼠盲腸還觀察到非正常的表現(xiàn)，如重量增加、盲腸指數(shù)升高等，而逍遙散干預(yù)能夠糾正這些表現(xiàn)。②發(fā)現(xiàn)盲腸菌群多態(tài)性最顯著，可作為研究部位;分析ERIC-PCR指紋圖譜發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組相比，模型組的ERIC-PCR指紋圖譜發(fā)生顯

5、著改變，給藥組則有明顯恢復(fù);③與正常對(duì)照組相比，模型組的PCR-DGGE指紋圖譜有明顯改變，但給藥組表現(xiàn)出不同的變化趨勢(shì)，測(cè)序結(jié)果表明Lachnospiraceae bacterium、Lactobacillus animali、Burkholderialesbacterium和Lactobacillus reuteri改變最為明顯。④正常對(duì)照組盲腸無(wú)明顯異常改變。模型組盲腸組織有所改變，但無(wú)明顯可見(jiàn)的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。給藥組均有不同程度的

6、改善。⑤與正常對(duì)照組相比，與炎癥相關(guān)各基因在模型組均表達(dá)上調(diào);逍遙散和鹽酸氟西汀干預(yù)后，各基因均有不同程度的表達(dá)下調(diào)。⑥與正常對(duì)照組相比，模型組盲腸組織的化學(xué)成分發(fā)生顯著改變，但給藥組則表現(xiàn)出不同的變化特點(diǎn)，沒(méi)有顯著的回調(diào)趨勢(shì)。
　　綜上所述，本文建立了適于分析抑郁動(dòng)物腸道菌群的ERIC-PCR和PCR-DGGE方法，發(fā)現(xiàn)慢性溫和性不可預(yù)知應(yīng)激能夠引起機(jī)體腸道菌群及腸道組織形態(tài)、組織化學(xué)及與炎癥相關(guān)基因表達(dá)發(fā)生明顯改變，其中盲腸變