1、目的：脫-γ-羧基凝血酶原(DCP)是肝細胞肝癌產生的異常凝血酶原，其機制可能與肝癌細胞缺乏或對維生素K利用障礙，造成依賴維生素K的γ谷氨酰羧化酶及輔酶活性降低，導致內質網產生的凝血酶原N端10個谷氨酸殘基羧化不全致DCP大量產生并分泌至血液中。我們認為，DCP不但可以作為肝細胞癌(HCC)診斷的標志物，更重要的作用在于其可能具有刺激肝癌細胞增殖作用。所以，抑制肝癌細胞DCP的產生和降低血液中含量，可能達到抑制DCP對肝癌細胞的進一步刺

2、激增殖作用，達到輔助治療肝癌的目的。維生素K類藥物及其衍生物被發(fā)現可能具有一定的抑制肝癌細胞產生DCP作用，降低血液DCP水平，有效抑制肝癌細胞生長，改善臨床癥狀，作用機制可能與其促進肝癌細胞γ谷氨酰羧化酶活性有關。本研究通過實驗觀察了維生素K2對肝細胞肝癌的抑制作用，證實了其與降低DCP表達之間的相關性。 方法：體外實驗，以MTT法檢測了VitK2對人肝癌細胞(HCC)生長抑制作用，以集落形成法測定VitK2對長時間接觸腫瘤細

3、胞克隆原細胞的抑制活性。以Transwell小室模型方法觀察了VitK2對HCC細胞體外侵襲能力的抑制作用。體內實驗，以裸鼠接種人肝癌細胞，灌胃給予VitK2，觀察其對HCC細胞的生長抑制作用。DCP表達水平檢測方法，以ELISA法檢測體外培養(yǎng)細胞上清液和動物血液DCP水平；以Westernblot和免疫組織化學法分析HCC細胞DCP表達狀態(tài)。 結果：體外結果顯示，不同劑量VitK2與HCC細胞孵育不同時間，VitK2對HCC增

4、殖具有一定的生長抑制作用，并呈現劑量和接觸時間依賴性關系。VitK2具有明顯抑制HCC細胞侵襲和穿過Matrigel的能力，其對腫瘤細胞的抑制增殖作用在裸鼠移植HCC細胞實驗中得到證實。在研究VitK2抑制HCC細胞增殖與DCP表達水平相關性方面，VitK2(2-40μM)明顯降低HCC細胞培養(yǎng)上清液中。DCP表達水平，對HCC生長抑制作用和DCP水平下降呈現相關性，這種作用在裸鼠移植人肝癌細胞表達DCP及VitK2治療實驗中得到證實。