1、目的:
　　 缺血性腦血管病仍是現代社會影響人類健康的最主要的疾病之一，其死亡率高、致殘率高。腦缺氧缺血預處理被認為是一種最強的神經內源性保護現象，但由于其是損傷性預適應，局部的缺血預處理多是在重要器官（如腦、心臟等）進行操作，有誘發(fā)心肌梗死和中風的危險，其在臨床引用仍然有很大的限制。
　　 全身低氧預處理(whole body hypoxic preconditioning，WHPC)是預處理應用中的一項突破，研究證實

2、，其同樣具有器官保護作用。且對局部器官的損傷更小，不需為提前的反復短暫的器官缺血而進行手術，不易引起感染，且低氧濃度和時間可以調節(jié)，可控性好。但是在實施WHPC的過程中會對人體血流動力學造成嚴重影響，清醒狀態(tài)難以耐受。所以在麻醉狀態(tài)下應用WHPC成為必然。
　　 星形膠質細胞(astrocyte，AST)參與細胞骨架的組成，在神經發(fā)育中可引導神經元遷移，促進神經元存活與分化，對神經元具有支持、營養(yǎng)的作用，分泌多種神經營養(yǎng)因子和生

3、長因子，同時還具有參與調節(jié)細胞內外離子平衡，與周圍神經元建立廣泛的連接。近年來大量的研究證明，在病理損傷的狀態(tài)下，AST可以反復的增生、活化，早期可以保護神經元，促進其修復再生，但晚期由于膠質細胞活化造成瘢痕增生，反而不利于神經元的修復，甚至可造成神經元進一步損傷。GFAP是星形膠質細胞中最主要的中間絲蛋白，是AST的發(fā)育過程中細胞骨架的重要組成部分。GFAP表達的強弱可以反映星形膠質細胞的功能狀態(tài)，是被公認為星形膠質細胞的特征性標記物

4、。
　　 本研究擬探討將全身低氧預處理和目前臨床上應用最廣泛的靜脈麻醉藥物之一異丙酚聯(lián)合應用，觀察其對局灶性腦缺血再灌注大鼠星形膠質細胞的影響。我們通過異丙酚聯(lián)合低氧預處理后，制備大鼠局灶性腦缺血再灌住損傷模型，檢測腦組織不同區(qū)域GFAP表達的變化，為異丙酚聯(lián)合低氧預處理治療缺血性腦血管疾病提供新的依據。
　　 方法:
　　 1、動物選擇及分組選擇健康成年SD雄性大鼠130只，體重180g～250g，隨機分為缺血

5、再灌注損傷組（IR組，n=40）;全身低氧預處理組（WHPC組，n=40）;異丙酚聯(lián)合全身低氧預處理組（WHPC+P組，n=40）;無梗塞組(Sham組，n=10)。
　　 2、模型評價分別在缺血兩小時再灌注1、3、7、14、21d不同的時間點進行大鼠行為學評分;HE染色觀察梗死中心和半暗帶神經細胞的病理改變。
　　 3、低氧預處理自制常壓有機玻璃低氧箱，大小100cm*80cm*60cm。設進氣口，出氣口，氣體濃度檢測

6、口，箱體兩側裝有小型風扇，混勻箱內氣體。每次最多放入5只大鼠，進氣口出通入氮氣，當箱內的氧濃度降為8％時，開始計時。3h后打開低氧箱，將大鼠放回鼠舍，自由飲食、飲水。24h后制備大鼠MCAO模型。
　　 4、局灶性腦缺血再灌注大鼠損傷模型的制備采用ZeaLonga法制備大鼠局灶性腦缺血(middle cerebral artery occlusion MCAO)2h再灌注損傷的模型。假手術組僅分離頸內外動脈并結扎，但不插線。

7、r>　　 5、GFAP、NEUN蛋白檢測 IR組;WHPC組;WHPC+P組;Sham組，在缺血2h再灌注后1d，3d，7d，14d，21d分別取腦，利用免疫組化技術測定腦組織GFAP/NEUN的表達。
　　 6、學習記憶能力檢測雄性SD大鼠，隨機分為IR組;WHPC組;WHPC+P組;Sham組，各組大鼠在造模后7d、14d、21d取材前5d進行Morris水迷宮試驗，分別進行巡航定位試驗4d和隨后的空間探索試驗1d。分別記

8、錄各組大鼠各時間點巡航定位試驗的逃避潛伏期、空間探索試驗中穿越平臺的次數。
　　 結果:
　　 1、各實驗組和對照組大鼠的性別、鼠齡、體重差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2、免疫組化結果顯示造模成功后1d、3d，IR組、WHPC組、WHPC+P組梗死中心GFAP的表達量與sham組相比增多，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與IR組相比，WHPC組、WHPC+P組表達量增加(P＜0.05)，但后兩者之

9、間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。造模成功后7d、14d，各組梗死中心GFAP的表達量較sham組明顯減少(P＜0.05)，但各組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3、IR組、WHPC組、WHPC+P組造模成功后各相應時間點邊緣帶GFAP表達量較sham組明顯增加(P＜0.05);WHPC組、WHPC+P組在造模后1d、3d、7d GFAP表達量相對于IR組增多(P＜0.05);造模后3d，WHPC組、WHPC+P組

10、GFAP的表達量達高峰，IR組在造模后7d達高峰，WHPC組、WHPC+P組GFAP表達量相對于IR組表達高峰提前;WHPC組較WHPC+P組表達量增加，但差異沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4、在梗死中心和缺血半暗帶IR組、WHPC組、WHPC+P組NEUN表達與sham組相比明顯減少(P＜0.05);WHPC組、WHPC+P組各相應時間點NEUN表達量較IR組明顯增加，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)
　　

11、 5、IR組、WHPC組、P+WHPC組相對于sham組Morrs水迷宮中逃避潛伏期增加(P＜0.05); WHPC組、P+WHPC組逃避潛伏期較IR組縮短(P＜0.05)。WHPC組、P+WHPC組穿越平臺次數較IR組增加(P＜0.05)，WHPC組、P+WHPC組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 1、全身低氧預處理可以激活膠質細胞增生活化，使GFAP表達量增高，表達高峰提前。從而在缺血早期保