1、針灸，是中國傳統(tǒng)醫(yī)學的重要組成部分，應用于臨床實踐已有幾千年的歷史。由于其獨特的治療方法、神奇的治療效果，針灸逐漸得到了世界的認可和接納，尤其是針刺鎮(zhèn)痛效應更是被全世界所關注。但是，穴位、經(jīng)絡的物質基礎是什么？針刺效應是如何產生的？經(jīng)穴信號到底是如何傳導的？這些問題至今沒有獲得令人滿意的回答。縫隙連接(gap junction，GJ)是動物細胞間最普遍存在的親水性低電阻通道。由縫隙連接介導的細胞間通訊(gap junctional in

2、tercellular communication，GJIC)是細胞間直接傳遞信號的重要方式之一，在細胞生長發(fā)育、多細胞器官間的協(xié)調及機體自我穩(wěn)定控制方面有著重要作用。縫隙連接蛋白 (connexin，Cx)是構成縫隙連接通道的基本結構和功能蛋白。前人的研究結果表明，針刺能引起與傳統(tǒng)意義的經(jīng)絡一致的線性現(xiàn)象，同時測得該線上表現(xiàn)為低電阻。那么，針刺，以及由此引起的循經(jīng)感傳現(xiàn)象，針刺鎮(zhèn)痛等針刺效應、縫隙連接細胞間通訊之間是否存在內在的聯(lián)系？

3、
　　 因此，我們提出了如下假說：具有低電阻特性的皮膚、皮下組織細胞間縫隙連接是經(jīng)穴之間信號傳導的主要通道，由縫隙連接介導的細胞間通訊為經(jīng)穴信號傳遞的主要方式，細胞間液、組織間液為通道緩沖系統(tǒng)。一旦經(jīng)穴接受刺激，縫隙連接和縫隙連接通訊將被激活，在神經(jīng)-體液因素的共同作用下信號將沿著體表低電阻區(qū)域細胞間的縫隙連接直接傳遞，而大腦對經(jīng)穴接受的刺激信號具有整合作用，經(jīng)穴、大腦、效應靶器官之間可能產生對話?；谝陨霞僬f，我們設計了如下研

4、究方案：(1)首先著重研究了皮膚中主要的縫隙連接蛋白Cx43在大鼠穴位、經(jīng)脈上的表達及針刺對該表達的影響(第一部分)，探討了穴位、經(jīng)脈與縫隙連接通訊聯(lián)系的物質基礎；(2)確定了穴位、經(jīng)脈存在豐富的縫隙連接蛋白Cx43的表達并存在一定的循經(jīng)特異性后，應用RNA干擾技術沉默大鼠穴位局部縫隙連接蛋白的表達，觀察對針刺效應的影響。此部分分為兩部分：①針對大、小鼠Cx43 mRNA序列，構建Cx43特異性shRNA真核表達載體并進行體外干擾效率的