1、目的：：通過(guò)建立大鼠離體心臟缺血再灌注模型，探討神經(jīng)再生素對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用及其可能機(jī)制。 方法：在Langendorff離體心臟體外灌注模型復(fù)制基礎(chǔ)上，采用隨機(jī)對(duì)照方法將實(shí)驗(yàn)對(duì)象60只雄性S-D大鼠平均分為7組(1)正常(N)組：正常灌注11O分鐘；(2)缺血再灌注(C)組：正常灌注30分鐘，左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘；(3)神經(jīng)再生素(NerveRegenerationFactor,NRF)小劑量(S)

2、組：正常灌注20分鐘，用NRFlmg/L灌注1O分鐘后左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘；(4)神經(jīng)再生素中劑量(M)組：正常灌注20分鐘，用NRF3mg/L灌注1O分鐘后左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘；(5)神經(jīng)再生素大劑量(L)組：正常灌注20分鐘，用NRF10mg/L灌注10分鐘后左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘；(6)葛根素組(Puerarin，Pue)：正常灌注20分鐘，用葛根素(O.5g/L)灌注10分鐘后左冠狀

3、動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘；(7)L-精氨酸組(L-Arginine，L-arg)：正常灌注20分鐘，用L-精氨酸(10mg/L)灌注10分鐘后左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎20分鐘，再灌60分鐘。實(shí)驗(yàn)中記錄每只大鼠平衡灌注20分鐘末、再灌注1分鐘、5分鐘、lO分鐘、15分鐘、30分鐘、60分鐘末的心功能變化，包括心率(HR)、左室最高壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室壓力升高最大速率(+dp/dtmax)、左室壓力降低最大速率(-d

4、p/dtmax)。并測(cè)定平衡灌注20分鐘末及復(fù)灌5分鐘時(shí)冠脈流出液中肌酸激酶(CK)含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定心肌組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量；每組中任意取四只標(biāo)本留做免疫組化，測(cè)定組織中Caspase-3的含量；每組中任取一組標(biāo)本做電鏡檢查；每組取六只標(biāo)本做RT-PCR，測(cè)定其iNOS、eNOS的表達(dá)變化。 結(jié)果：1.血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)：C組左前降支結(jié)扎后，LVDP下降至原來(lái)的30％一60

5、％，LVEDP明顯上升，表明結(jié)扎成功，松開(kāi)線頭后，LVDP逐漸恢復(fù)至正常水平，表明再灌注成功。與C組相比，S組作用不明顯，M組LVDP升高、LVEDP下降、RPP升高、CF增加且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，L組除HR外，其他指標(biāo)與C組相比均有顯著差異(P

6、M組CK、MDA值下降且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)，SOD活性增高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05)，NO較C組升高且有顯著差異(P

7、，無(wú)溶解壞死，大部分線粒體正常，僅見(jiàn)個(gè)別線粒體輕度腫脹，細(xì)胞核接近正常。 4.心肌NOSmRNA表達(dá)的變化：各用藥組iNOSmRNA表達(dá)比C組下降，eNOSmRNA的表達(dá)較C組上升。 5.Caspase-3蛋白表達(dá)的變化：N組Caspase-3蛋白表達(dá)不明顯，C組陽(yáng)性表達(dá)明顯增多，各用藥組均有不同程度減少。 結(jié)論：①NRF對(duì)離體心肌的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，能夠明顯提高心肌組織對(duì)缺血再灌注損傷的耐受性。