1、該研究的主要目的是建立乙肝表面抗原基因（S基因）在煙草及煙草懸浮細(xì)胞系中穩(wěn)定表達(dá)的轉(zhuǎn)化體系.首先將S基因克隆入一個(gè)植物基因工程表達(dá)載體pCAMBIA1301.這個(gè)載體不但具有可插入植物基因組的T-DNA區(qū)以及抗生素篩選基因,而且?guī)в锌焖勹b別轉(zhuǎn)化株的報(bào)告基因GUS.表達(dá)載體被轉(zhuǎn)化入農(nóng)桿菌LBA4404以后,用農(nóng)桿菌侵染的方法去轉(zhuǎn)化煙草和煙草懸浮細(xì)胞系BY-2（Bright Yellow-2）.通過對(duì)轉(zhuǎn)化株的鑒定,方法包括PCR、GUS染色

2、、酶連免疫分析（ELISA）和WESTERN BLOT等,證明煙草和煙草細(xì)胞系能夠成功表達(dá)乙肝表面抗原.同時(shí)我們對(duì)轉(zhuǎn)化株粗提蛋白進(jìn)行了硫酸銨分級(jí)沉淀,ELISA分析表明S抗原在40﹪～50﹪的硫酸銨濃度范圍內(nèi)沉淀最多.對(duì)T1代轉(zhuǎn)化煙草的初步遺傳分析提示,S基因有可能為單拷貝插入.我們還對(duì)轉(zhuǎn)化的BY2細(xì)胞進(jìn)行了顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)S基因的轉(zhuǎn)入并沒有影響B(tài)Y2細(xì)胞的生長(zhǎng)周期長(zhǎng)短及外觀形態(tài).在該課題的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步的研究將著重于植物源性病毒抗原