腦復(fù)聰對LPS激活的小膠質(zhì)細(xì)胞合成環(huán)氧合酶-2和分泌前列腺素E2作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]
   觀察中藥腦復(fù)聰含藥血清對脂多糖激活后的小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2的形態(tài)、BV-2中COX-2蛋白的表達(dá)以及BV-2上清液中PGE2分泌量水平的影響。
   [方法]
   將體外培養(yǎng)的小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2分成:正常對照組、LPS組(終刺激濃度1μg/ml)、高、中、低劑量腦復(fù)聰(NFC)含藥血清組,培養(yǎng)24h,用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),蛋白印跡方法檢測BV-2中COX-2蛋白的表達(dá),酶聯(lián)

2、免疫吸附法測定培養(yǎng)BV-2上清液中PGE2蛋白的濃度。
   [結(jié)果]
   1、BV-2細(xì)胞的形態(tài):
   通過倒置相差顯微鏡觀察:正常組BV-2細(xì)胞大約70-80%貼壁良好,胞體呈三角狀、桿狀或梭狀,大約20-30%懸浮;1μg/ml LPS刺激24h后BV-2約有10-20%貼壁,80-90%懸浮,大多數(shù)細(xì)胞聚集成團(tuán),有的胞體變?yōu)閳A形。NFC高、中、低劑量含藥血清組貼壁細(xì)胞數(shù)量較LPS組增多,對LPS所致的

3、形態(tài)變化有一定的恢復(fù)作用。
   2、BV-2中COX-2蛋白的表達(dá):
   采用蛋白印跡方法檢測,結(jié)果顯示:LPS組BV-2中COX-2蛋白含量較正常對照組升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與LPS組相比,NFC含藥血清各劑量(高、中、低劑量)組BV-2中COX-2蛋白含量均下降,差異顯著(P<0.01)。
   3、BV-2上清液中PGE2蛋白的濃度:
   采用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測BV-2上

4、清液中PGE2含量,結(jié)果顯示:LPS組較正常對照組BV-2上清液中PGE2含量升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與LPS組相比,NFC各劑量(高、中、低劑量)含藥血清組含量均下降,差異顯著(P<0.01)。
   [結(jié)論]
   NFC含藥血清可以顯著下調(diào)脂多糖激活后BV-2中COX-2蛋白的表達(dá)量并顯著減少BV-2上清液中PGE2的分泌量。
   [創(chuàng)新點]
   體外培養(yǎng)小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞BV

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