1、第一部分前體蛋白酶與PKG-1在肺癌組織中的表達以及臨床意義研究
　　目的：探討PC家族蛋白和PKG-1蛋白在非小細胞肺癌組織中的表達及其與臨床病理特征之間的關系。
　　方法：免疫組織化學法檢測178例非小細胞肺癌患者，腫瘤組織標本以及癌旁組織標本中PC家族蛋白以及PKG-1蛋白表達水平；醫(yī)學統(tǒng)計學分析，各因子表達水平與患者性別、年齡、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、遠處轉(zhuǎn)移等臨床參數(shù)的相互關系。
　　結(jié)果：
　

2、　1. PC-5、furin、PC-7和PKG-1在非小細胞肺癌組織中及癌旁組織中的表達:
　　PC-7、furin在非小細胞肺癌組織中陽性表達率分別為:44.4％以及51.7%，均顯著高于非小細胞肺癌癌旁組織（P<0.05)；PC-5在非小細胞肺癌中的表達(19.1%)低于癌旁組織(20.6%)(P>0.05)；PKG-1在非小細胞肺癌及癌旁組織中陽性表達率分別為6.2%和57.8%（P<0.05）。
　　2. PC-5、

3、furin、PC-7和PKG-1與非小細胞肺癌臨床病理參數(shù)的關系：
　　PC-7、furin表達均與非小細胞肺癌分期、組織分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關（P<0.05），與性別、年齡無關（P>0.05）；PC-5在鱗癌表達率（22.2%）顯著低于腺癌表達率（75.6%）；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期負相關（P<0.05），與性別、年齡無關（P>0.05）。PKG-1與各非小細胞肺癌臨床病理參數(shù)均無關（P>0.05）。
　　結(jié)論：PC-7、

4、furin可能在非小細胞肺癌的發(fā)生與發(fā)展中起促進作用，PKG-1與非小細胞肺癌的發(fā)展無關。
　　第二部分非小細胞肺癌前體蛋白酶對PKG-1蛋白剪切的研究
　　目的：通過前體蛋白酶的過表達以及抑制其活性，檢測 cGMP依賴性蛋白激酶的剪切水平，探討 cGMP依賴性蛋白激酶選擇性剪切的分子機制。
　　方法：構建 cGMP依賴性蛋白激酶表達質(zhì)粒 pCDNA3-PKG-1，通過hexa-D-arginine、dec-RVKR-

5、cmk以及α1-PDX抑制前體蛋白酶活性；過表達前體蛋白酶表達的質(zhì)粒；免疫印跡法檢測在抑制以及過表達前體蛋白酶的條件下，cGMP依賴性蛋白激酶蛋白分子的剪切水平變化；構建不同位點，點突變的 cGMP依賴性蛋白激酶分子異構體，檢測前體蛋白酶對cGMP依賴性蛋白激酶剪切的蛋白靶點。通過免疫熒光法檢測抑制前體蛋白酶活性后，對cGMP依賴性蛋白激酶核轉(zhuǎn)位的抑制作用。
　　結(jié)果：Western-bloting顯示細胞內(nèi)過表達前體蛋白酶家族成

6、員 furin，PC7能夠促進細胞內(nèi) cGMP依賴性蛋白激酶蛋白分子剪切，而通過 dec-RVKR-cmk以及α1-PDX能夠抑制細胞內(nèi)c G M P依賴性蛋白激酶剪切；通過不同的PKG異構體作用。可以發(fā)現(xiàn)前體蛋白酶對c G M P依賴性蛋白激酶的剪切位點在161位氨基酸處。抑制前體蛋白酶活性能夠抑制 cGMP依賴性蛋白激酶從胞漿中轉(zhuǎn)位進入細胞核內(nèi)。
　　結(jié)論：前體蛋白酶能夠剪切c G M P依賴性蛋白激酶分子，其剪切位點為161