1、目的:應(yīng)用SAMP8小鼠為研究對象,觀察去勢及雄激素補(bǔ)充治療對海馬突觸結(jié)構(gòu)的影響,初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法:選用雄性6月齡快速老化SAMP8小鼠15只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(P8組)、去勢組、去勢+雙氫睪酮補(bǔ)充治療組(DHT組),每組5只,選取雄性6月齡抗快速老化SAMR1小鼠5只作為同源正常對照組(R1組)。去勢組和DHT組小鼠切除睪丸,DHT組于去勢術(shù)1天后,頸背皮下注射雙氫睪酮1mg/(kg·day),其余各組注射等量

2、醫(yī)用玉米油,每天注射1次,共注射21天。
　　 組織制備、切片及染色觀察:將輸液針刺入左心室,剪開右心耳,用生理鹽水快速沖洗,3％多聚甲醛,1％戊二醛灌注固定。自上丘至視交叉節(jié)段冠狀位取腦組織,用刀片將此組織從正中矢狀位分為左右兩半,左半腦用于Golgi染色,光鏡下計(jì)數(shù)樹突棘密度;右半腦用于制備透射電鏡樣本,觀察海馬CA1區(qū)突觸超微結(jié)構(gòu),并應(yīng)用體視學(xué)定量方法計(jì)算各組海馬CA1區(qū)興奮性突觸數(shù)密度、突觸接觸區(qū)面密度、突觸后致密物質(zhì)平

3、均厚度等參數(shù)。
　　 結(jié)果:
　　 1、Golgi染色結(jié)果:R1組海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)二、三級項(xiàng)樹突樹突棘密度分別為1.40±0.19個/μm和1.71±0.38個/μm,高于其他各組(P＜0.01)。P8組CA1區(qū)和CA3區(qū)分別為1.17±0.18個/μm和1.46±0.41個/μm;DHT組CA1區(qū)和CA3區(qū)分別為1.11±0.15個/μm和1.35±0.19個/μm;P8組與DHT組密度相近(P＞0.05),均小

4、于R1組,去勢組CA1區(qū)和CA3區(qū)密度分別為0.72±0.16個/μm和1.03±0.26個/μm,相比其他各組密度最小(P＜0.05)。
　　 2、透射電鏡觀察及體視學(xué)分析結(jié)果:R1組海馬CA1區(qū)放射層興奮性突觸數(shù)密度Nv、突觸接觸區(qū)面密度Sv、突觸后致密物質(zhì)平均厚度Dv分別為0.144±0.02個/μm3、0.51±0.10μm2/μm3、51.3±10.9nm,各值均高于其他各組(P＜0.01)。P8組海馬CA1區(qū)突觸Nv

5、、Sv、Dv各值分別為0.10±0.01個/μm3、0.36±0.02μm2/μm3、31.8±8.7nm;DHT組Nv、Sv、Dv各值分別為0.09±0.02個/μm3、0.33±0.06μm2/μm3、28.8±9.7nm,P8組與DHT組各項(xiàng)均相近(P＞0.05),均小于R1組,去勢組Nv、Sv、Dv各值分別為0.07±0.01個/μm3、0.19±0.03μm2/μm3、22.8±5.8nm,相比其他各組密度最小(P＜0.05)