1、研究背景:
　　 食管癌是人類常見的惡性腫瘤之一，近年來，其發(fā)病率呈逐步上升趨勢。我國是食管癌的高發(fā)區(qū)之一，發(fā)病率和死亡率均居世界之首，病理類型以食管鱗癌為主，大約占總數的90％以上。食管鱗癌的發(fā)生是多階段、多基因參與的過程，其中遺傳學和表觀遺傳學的異常改變都起著非常重要的作用。表觀遺傳學是研究基因表達的學科，它是指基因表達的改變不依賴DNA序列的變化。幾乎所有類型的人類腫瘤中都發(fā)現表觀遺傳的異常改變。表觀遺傳的異常可導致抑癌基

2、因的表達沉默，其中DNA甲基化在人類腫瘤中是研究最多的表觀遺傳調控方式，許多信號通路中的抑癌基因在不同類型的腫瘤中都發(fā)現啟動子區(qū)高甲基化。BNIP3是近年來發(fā)現的具有抑癌作用的基因，BNIP3基因在正常組織中普遍表達，而在多種腫瘤中卻表達減少或缺失。BNIP3在食管癌中的表達及基因表觀遺傳學變化情況和其對蛋白表達的調控機制尚不清楚。
　　 研究目的:
　　 1.觀察食管鱗狀細胞癌組織及正常食管黏膜組織中BNIP3和HIF

3、-1α蛋白的表達情況，分析二者與食管鱗狀細胞癌臨床病理特征之間的關系，并分析其相關性;
　　 2.檢測食管鱗狀細胞癌組織及正常食管黏膜組織BNIP3基因甲基化狀態(tài)，并檢測相應組織的BNIP3蛋白表達情況。研究BNIP3蛋白與BNIP3基因甲基化之間的對應關系，探討它們在食管鱗狀細胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用和臨床意義。
　　 資料與方法:
　　 1.收集經手術治療的食管鱗狀細胞癌患者的癌組織標本72例，正常食管黏膜組織

4、標本30例。應用組織芯片免疫組化S-P染色技術測定BNIP3蛋白及HIF-1α蛋白的表達情況，并分析其與臨床病理之間的關系;
　　 2.收集50對食管鱗癌和正常食管黏膜組織標本，應用甲基化特異性PCR法檢測食管鱗癌組織和正常食管黏膜組織中BNIP3基因甲基化狀態(tài)，并應用免疫組化方法檢測相應組織中BNIP3蛋白表達情況;
　　 3.應用SPSS17.0軟件，對實驗結果進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果:
　　 1

5、.食管鱗癌組織中BNIP3蛋白表達陽性率37.5％(27/72)，明顯低于正常食管黏膜組織的60％(18/30)(P=0.037)，差異有統(tǒng)計學意義;HIF-1α蛋白表達陽性率52.7％(38/72)，明顯高于正常食管黏膜組織的13.3％(4/30)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義;
　　 2.BNIP3低表達與食管鱗癌的腫瘤浸潤深度、TNM分期、淋巴結轉移呈負相關（分別P=0.035、P=0.048、P=0.033），差異

6、有統(tǒng)計學意義。HIF-1α高表達與腫瘤浸潤深度、TNM分期、淋巴結轉移呈正相關(分別P=0.023、P=0.004、P=0.002)，差異有統(tǒng)計學意義;
　　 3.BNIP3的表達與HIF-α的表達呈負相關（r=-0.274，P=0.020），差異有統(tǒng)計學意義;
　　 4.食管鱗癌組織中BNIP3基因甲基化率60％(30/50)，明顯高于正常食管黏膜組織的22％(11/35)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義;相應組織

7、BNIP3蛋白表達陽性率34％(17/50)，低于正常食管黏膜組織的56％(28/50)(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義;
　　 5.食管鱗癌組織中BNIP3基因甲基化情況與BNIP3蛋白表達都與食管鱗癌的TNM分期和有無淋巴結轉移顯著相關;
　　 6.食管鱗癌組織中BNIP3基因高甲基化與組織BNIP3蛋白低表達相關(P=0.000)，差異有統(tǒng)計學意義;而正常食管黏膜組織中BNIP3基因的甲基化情況與BNIP3蛋白

8、表達無顯著相關性。
　　 結論:
　　 1.BNIP3在食管鱗癌中低表達，而在正常食管黏膜中呈高表達，同時食管鱗癌BNIP3基因存在高度甲基化。因此，食管鱗癌BNIP3高甲基化可能是食管鱗癌BNIP3表達缺失的主要因素，也是食管鱗癌發(fā)生的重要原因;
　　 2.BNIP3低表達與食管鱗癌的侵犯深度、分期、淋巴結轉移情況密切相關，因此，BNIP3在食管鱗癌的發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用;
　　 3.BNIP3的低