1、第一部分RNAi技術(shù)干擾人卵巢癌OVCAR3細胞中CD105、ki67基因表達
　　目的：檢測siRNA干擾前后人卵巢癌OVCAR3細胞中CD105、ki67基因和蛋白表達的變化以確定沉默效果。
　　方法：選取CD105-siRNA、Ki67-siRNA并稀釋成不同濃度，在脂質(zhì)體LipofectamineTM2000的介導下轉(zhuǎn)染進入人卵巢癌OVCAR3細胞。實時熒光定量PCR、Western blot方法驗證siRNA干擾效

2、果。
　　結(jié)果：構(gòu)建并合成CD105-siRNA和 ki67-siRNA及各自的陰性對照序列，并轉(zhuǎn)染進人卵巢癌OVCAR3細胞。
　　1、實時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示RNA干擾后人卵巢癌OVCAR3細胞中CD105、ki67兩種基因的表達均下降。以空白對照組為基準，CD105-NC組91.64％，轉(zhuǎn)染 CD105-siRNA終濃度為50nmol/L和100 nmol/L組的OVCAR3細胞中CD105mRNA的相對表達水平

3、分別為46.34%和35.23%，明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）；以空白對照組為基準，Ki67-NC組1.03，轉(zhuǎn)染Ki67-siRNA終濃度為50nmol/L和100 nmol/L組的人卵巢癌細胞中Ki67-mRNA的相對表達水平分別為22%和14%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）。
　　2、Western Blot圖譜結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染CD105-siRNA、Ki67-siRNA后，OVCAR3細胞中CD105、

4、Ki67蛋白水平均明顯降低。
　　結(jié)論：
　　本研究選取的CD105-siRNA、Ki67-siRNA可成功沉默OVCAR3細胞中CD105、Ki67基因和蛋白的表達水平，為第二部分細胞功能學實驗提供實驗依據(jù)。
　　第二部分靶向沉默CD105、ki67基因表達前后OVCAR3細胞侵襲能力的改變
　　目的：探討靶向沉默CD105和Ki67基因表達對人卵巢癌OVCAR3細胞侵襲能力的改變來研究CD105、Ki67在卵

5、巢癌發(fā)病中的分子作用機制，并分析CD105和Ki67在卵巢上皮癌的發(fā)生發(fā)展中是否具有一定的相關(guān)性，為卵巢癌的基因治療提供理論依據(jù)。
　　方法：檢測CD105、Ki67單基因干預和聯(lián)合干預前后穿過 Transwell小室內(nèi)基質(zhì)膜的細胞數(shù)。
　　結(jié)果：結(jié)果顯示：CD105-siRNA組穿膜細胞數(shù)（26.8±2.3個），Ki67-siRNA組穿膜細胞數(shù)為（32.2±3.9個），和各自的陰性對照組（NC1組45.2±4.3個、NC2

6、組50±3.1個）及空脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染組（50.2±2.5個）相比，穿膜細胞數(shù)減少，差異明顯（P＜0.01）；聯(lián)合干預組在高倍視野下平均穿膜細胞數(shù)減少更明顯（11.8±3.8個），差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。而NC1、NC2組與空白對照組相比，穿過基質(zhì)膜的細胞數(shù)相差不大，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：CD105-siRNA和ki67-siRNA沉默CD105、ki67基因和蛋白的表達后，OVCAR3細胞的侵襲能力