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![流動式核黃素光化學法病毒滅活血漿制備體系的建立與效果評價.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/0cba6a4b-ff86-4637-964a-c2409ef3ff98/0cba6a4b-ff86-4637-964a-c2409ef3ff981.gif)
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文檔簡介
1、目的
基于核黃素聯(lián)合紫外線滅活血漿病毒的方法原理,研制出一種流動式的血漿病毒滅活設(shè)備,實現(xiàn)流動式批量處理血漿的目的,評估經(jīng)該設(shè)備處理后,血漿中血漿病毒滅活效果和血漿蛋白的保持率。
方法
1.根據(jù)大量關(guān)于核黃素光化學法的文獻,以及對Mirasol系統(tǒng)的研究,建立核黃素光化學法滅活病毒所需的基本參數(shù)。自主設(shè)計流動式病毒滅活設(shè)備的圖紙,挑選最佳方案,制作實驗室小試成品。
2.對制作成型的設(shè)備進行主要參數(shù)
2、的測定和測量,包括紫外燈的測定和樣品管的測量,保證設(shè)備的再塑性。
3.在血漿中加入一定量的病毒液模擬病毒污染血漿的狀況(血漿:病毒液為10∶1),再加入終濃度為60μmol/L的核黃素溶液。在經(jīng)設(shè)備不同時間的處理后,測定處理前和不同時間處理后血漿中病毒的毒力(TCID50),計算得出不同處理時間的病毒滅活效果。
4.選中四種血漿中的主要功能蛋白,在經(jīng)設(shè)備不同時間的處理后,測定處理前和不同時間處理后蛋白的活性,計算得出
3、不同處理時間的蛋白保持率。
結(jié)果
1.選定了紫外燈夾心石英管方案。
2.制作成型的設(shè)備,紫外光譜為313nm聯(lián)合365nm寬帶波峰,照射強度為6mW/cm2。石英流動管的透光率為95%,內(nèi)徑5mm,壁厚1mm。
3.選定了5min、10min、15min、20min四種處理時間。在5min處理后,病毒滅活效果最低,隨著處理時間的延長,病毒滅活效果也在增強。當時間達到10min時,VSV、PRV、E
4、MCV、PPV的平均滅活滴度大于4 logs;當處理時間達到20 min后,指示病毒的滅活滴度都達到5.5 logs以上。
4.經(jīng)不同時間的設(shè)備處理后,不同蛋白會對設(shè)備的處理產(chǎn)生不同的敏感度:在處理10min時,保持率最高的為AT-Ⅲ的90%,保持率最低為纖維蛋白原的60%;當處理時間為20min時,蛋白損失嚴重,最低的保持率是纖維蛋白原僅僅為28%。
結(jié)論
1.在不同的處理時間,病毒滅活效果和蛋白保持率也
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