1、[目的]：
　　本研究旨在建立一種多重熒光PCR方法對未結(jié)合型高膽紅素血癥患者尿苷二磷酸葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶1A1(uridine diphosphate glucuronosyltransferase1A1，UGT1A1)基因進行熒光PCR檢測，了解其突變情況，探討其突變類型與血清膽紅素水平的相關(guān)性，以及其運用于臨床診斷Gilbert綜合征(Gilbert syndrome，GS)及Crigler-Najjar綜合征(Crigler

2、-Najjar syndrome，CNS)的意義。
　　[方法]：
　　1.收集251例未結(jié)合型高膽紅素血癥患者以及201例健康體檢者外周靜脈血3ml，用EDTA抗凝。
　　2.按照北京艾德萊公司提供的DNA提取試劑盒對收集的外周靜脈血進行提取，-20度保存。
　　3.利用多重熒光PCR Tapman探針法對所提取的全血基因組UGT1A1基因A(TA)7TAA、Gly71Arg、Pro229Gln以及Try486

3、Asp四個位點進行檢測分型。
　　4.用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進行電泳分離并回收。
　　5.利用T-A克隆法對回收產(chǎn)物進行克隆擴增。
　　6.采用測序法對PCR擴增產(chǎn)物進行測序驗證。
　　[結(jié)果]：
　　1.PCR產(chǎn)物電泳及測序結(jié)果與其基因檢測表型完全一致。
　　2.在251例未結(jié)合型高膽紅素血癥患者中，單一位點雜合子突變95例，單一位點純合子突變44例，多位點復(fù)合突變53例。在201例健康體檢者

4、中，單一位點雜合子突變75例，單一位點純合子突變5例，多位點復(fù)合突變7例，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=80.89，P＜0.05)。
　　3.用spss19.0軟件經(jīng)卡方檢驗分析，A(TA)7TAA、Gly71Arg和Pro229Gln的P值均小于0.01，其在高膽紅素組的突變率明顯高于對照組，而Try486Asp由于樣本量少，差別無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.攜帶單一位點雜合突變患者的膽紅素水平低于攜帶多位點雜合復(fù)合突變患者的膽紅素水