1、環(huán)形泰勒蟲是一種蜱傳血液原蟲，能引起牛的熱帶泰勒蟲病。環(huán)形泰勒蟲和小泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞在體外表現(xiàn)具有無限增值（永生化）的能力，即其具有轉(zhuǎn)化宿主淋巴細胞的特性，因此被稱為可轉(zhuǎn)化淋巴細胞泰勒蟲。泰勒屬的寄生蟲是截止目前已發(fā)現(xiàn)的可使哺乳動物細胞發(fā)生永生化的唯一一類真核生物，為寄生蟲與宿主相互作用研究提供了理想模型。截至目前，人們已經(jīng)揭示了可轉(zhuǎn)化淋巴細胞泰勒蟲參與調(diào)控宿主細胞的部分機制，涉及到的分子有TashAT(Theileria

2、annulata macroschizont-specific AT hook-containing protein)、SVSP(subtelomere-encodedvariable secreted protein)等，并證明與NF-κB、ISG15、TGF-β、PI-3K、E2F等分子及凋亡調(diào)控路徑有關。目前，人們已經(jīng)證明了小泰勒蟲TpSCOP(T.parva schizont-derived cytoskeleton-bindi

3、ngprotein)蛋白能夠激活宿主細胞的NF-κB通路，進而實現(xiàn)對宿主細胞的調(diào)控。由于環(huán)形泰勒蟲TaSDP（T.annulata schizont-derived protein）蛋白與已知的的小泰勒蟲TpSCOP蛋白為同源蛋白。本研究對TaSDP基因進行了原核表達，利用了原核表達獲得的重組蛋白制備了兔源多克隆抗體并對該蛋白在環(huán)形泰勒蟲感染細胞上進行了定位，同時運用雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)就該蛋白對HEK293T細胞NF-κB信號通路的

4、影響做了初步的探索，確定了電穿孔轉(zhuǎn)染環(huán)形泰勒蟲感染細胞的最佳電轉(zhuǎn)緩沖液和電壓，為研究環(huán)形泰勒蟲TaSDP蛋白在轉(zhuǎn)化的宿主細胞中的作用奠定基礎。主要研究結(jié)果如下:
　　1.TaSDP基因的表達及TaSDP蛋白多克隆抗體的制備。利用PCR技術從環(huán)形泰勒蟲cDNA中擴增TaSDP基因，構(gòu)建原核表達載體進行蛋白的表達，rTaSDP蛋白以包涵體的形式存在;將純化后的融合蛋白免疫家兔，制備多克隆抗體。制備的抗體不僅可與重組表達的His-TaS

5、DP發(fā)生反應，而且可以識別天然的蟲體蛋白，為開展其在細胞調(diào)控方面的研究準備了材料。
　　2.TaSDP蛋白在環(huán)形泰勒蟲感染細胞中的定位。為探尋TaSDP蛋白在環(huán)形泰勒蟲感染細胞內(nèi)的位置，以純化的抗rTaSDP蛋白免疫血清為一抗，運用間接免疫熒光實驗，并借助于激光共聚焦顯微鏡對該蛋白進行細胞定位。結(jié)果表明，TaSDP蛋白定位于環(huán)形泰勒蟲裂殖體上。該蛋白可以作為一個標記分子用于后續(xù)裂殖體相關的研究。
　　3.TaSDP蛋白對HE