1、目的:該文在DNA損傷誘導(dǎo)的G1、S、G2/M期阻滯模型中研究了反義基因技術(shù)單獨(dú)封閉Chk1、Chk2、Plk1基因或聯(lián)合封閉Chk1/Chk2及Chk1/Plk1基因條件下,細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)效率的變化特征及機(jī)制.鑒于評(píng)價(jià)靶點(diǎn)有效性的首要條件是必須在腫瘤組織中分布,目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于Chk1和Chk2在腫瘤組織中實(shí)際表達(dá)狀況的報(bào)道很少,且無(wú)明確結(jié)論.我們進(jìn)而觀察了Chk1、Chk2、P1k1蛋白在不同腫瘤組織和正常對(duì)照組織中的分布

2、特點(diǎn),以評(píng)價(jià)Chk1、Chk2、Plk1作為腫瘤治療靶點(diǎn)的可行性.然而Chk1、Chk2、Plk1等分子靶點(diǎn)表達(dá)廣泛,缺乏腫瘤特異性,能否建立一種在繁復(fù)的細(xì)胞及基因組背景中特異性滅活腫瘤細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)的治療手段?我們受Heise和Hawkins工作的啟發(fā),進(jìn)一步建立了一種新的分子治療手段即構(gòu)建一種新的復(fù)制選擇性滅活腫瘤細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)的腺病毒載體來(lái)解決Chk1、Chk2、Plk1作為腫瘤治療的高效靶點(diǎn)而缺乏特異性的難題,從而達(dá)到調(diào)節(jié)腫瘤治

3、療敏感性,發(fā)展具有普遍意義的分子治療應(yīng)用技術(shù)途徑的目的.結(jié)論:1.<'60>Co和順鉑處理非同步化的腫瘤細(xì)胞可成功地建立G1、S、G2/M期阻滯模型;2.反義核酸技術(shù)無(wú)論單獨(dú)或聯(lián)合滅活Chk1、Chk2、Plk1基因均可消除細(xì)胞周期阻滯,顯著增強(qiáng)放、化療誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡;3.Chk1、Chk2分子靶點(diǎn)表達(dá)廣泛,不是腫瘤特異性分子,而Plk1蛋白在不同腫瘤組織中存在過(guò)表達(dá);4.構(gòu)建復(fù)制選擇性腺病毒可選擇性的在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,特異性殺滅腫