1、毒品是當今世界性公害。臨床戒毒治療周期長(一般采用3-6個月的連續(xù)給藥方案),只有堅持長期用藥,才能達到戒毒的臨床目的。傳統(tǒng)劑型需要頻繁給藥,而戒毒患者意志薄弱、順應性差,往往難以堅持到底,造成復吸率極高。研究開發(fā)被動給藥的長效制劑是解決該問題的一個有效途徑。微球注射劑是緩釋制劑的代表劑型之一,開發(fā)一個月注射一次的微球注射劑可以顯著延長給藥間隔,提高患者用藥的順應性;藥物以注射途徑進入體內還能避免戒毒患者因誘惑而自行去除藥物導致戒毒的失

2、敗。
　　鹽酸噻吩諾啡(Thienorphine hydrochloride, TNP)是軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所研制的國家一類新藥。該藥為阿片受體部分激動劑,抗嗎啡依賴作用強,有效劑量小,有可能成為一個安全有效的防復吸藥物。目前該藥無制劑上市,其片劑已獲得臨床研究批件,規(guī)格為0.2、0.5mg/片。
　　本課題以PLGA(75/25)分子量15000Da為載體,研制了鹽酸噻吩諾啡緩釋微球注射劑。本論文主要研究內容包括鹽

3、酸噻吩諾啡微球的處方和制備工藝研究、體外釋放度試驗方法學研究、體外釋藥機理研究、初步穩(wěn)定性考察、藥動學和藥效學研究(包括體內外相關性研究)以及微球的生物相容性研究。
　　1 O/W型乳化溶劑揮發(fā)法制備鹽酸噻吩諾啡微球
　　首先采用單因素優(yōu)化法,考察了理論載藥量(A)、PLGA濃度(B)、乳化劑PVA濃度(C)、乳化攪拌速度(D)、油水體積比(E)等影響因素,并采用主成分分析方法對實驗結果進行綜合分析,結果顯示理論載藥量(A)

4、、PLGA濃度(B)和乳化劑PVA濃度(C)是影響微球總體質量的主要因素。
　　采用星點設計安排實驗,效應面法進行優(yōu)化分析,考察了理論載藥量、PLGA濃度、PVA濃度對微球載藥量、包封率、平均粒徑和第1天微球釋藥百分數(F1d)的影響。確定了鹽酸噻吩諾啡微球的處方和優(yōu)化工藝。優(yōu)化后的處方和制備工藝重現性好,制備的微球大小均一,表面光滑圓整,平均粒徑為34.74μm,跨距為1.04,微球的包封率為57.3％,載藥量為4.57％,F1

5、d為12.17％,體外可持續(xù)釋藥21天。為考察優(yōu)化處方和工藝進行工業(yè)化大生產的可能性,本研究制備了1.5g量的微球,結果表明放大制備的微球性能良好,微球的包封率為64.12％,載藥量為5.13％,F1d為14.04％,粒徑為35.60μm,跨距為1.20,體外可持續(xù)釋藥21天。
　　2鹽酸噻吩諾啡微球的質量評價方法學研究
　　為控制鹽酸噻吩諾啡微球的質量,建立了HPLC微球載藥量測定方法、釋放介質中鹽酸噻諾啡含量測定方法及微

6、球有關物質檢查方法,方法準確、靈敏,輔料及降解產物不干擾主藥測定。
　　3鹽酸噻吩諾啡微球體外釋放度試驗的方法學及體外釋藥機理研究
　　在微球的體外釋藥研究中,由于國內外目前尚無統(tǒng)一或公認的方法,所以分別采用了不同的釋藥方法進行釋藥研究,并對釋藥結果和釋藥方法進行了綜合評價。由于鹽酸噻吩諾啡在水中不溶或幾乎不溶,因此首先進行了釋放介質的篩選。結果表明采用5％乙醇水溶液作為體外釋放介質可以滿足“漏槽條件”,且在該介質中鹽酸噻吩

7、諾啡能夠保持穩(wěn)定。針對直接釋藥法和透析釋藥法各自存在的弊端,對體外釋放條件進行了考察。進行直接釋藥法研究時,考察了釋放介質的體積對微球體外釋放度的影響;進行透析釋藥法研究時,考察了透析袋內溶液的濃度對藥物擴散速率和滲透系數的影響,以及透析袋內溶液的體積對微球釋藥速度的影響。利用高溫和酸性條件下PLGA的水解速度加快的原理,本文建立了加速釋藥的方法。對長期釋藥試驗和加速釋藥試驗的釋放度數據進行點點對應的相關性擬合,結果顯示鹽酸噻吩諾啡微球

8、加速釋藥1小時累積釋藥百分數 Y與長期釋藥1天的累積釋藥百分數y有以下相關性:Ln(100-y)=3.1192Ln(100-Y)-8.8383, R2=0.9677,加速釋藥法可以用來預測微球長期釋藥的釋放速率。
　　通過失重法間接了解PLGA微球的降解速度。采用Higuchi、零級和一級方程對體外釋藥曲線進行擬合。結果表明鹽酸噻吩諾啡微球體外釋藥曲線符合零級方程,這主要是降解和擴散機制共同作用的結果。
　　4鹽酸噻吩諾啡微

9、球的初步穩(wěn)定性研究
　　鹽酸噻吩諾啡微球采用60Co照射γ射線滅菌,結果顯示微球經100萬 rad輻射后,藥物的穩(wěn)定性和微球釋藥行為與輻射前相比沒有明顯變化。影響因素實驗表明光和熱對微球的穩(wěn)定性影響明顯。加速試驗和長期穩(wěn)定性試驗的結果表明,鹽酸噻吩諾啡微球應避光保存于4℃的環(huán)境中。
　　5鹽酸噻吩諾啡微球體內過程研究
　　以對抗嗎啡鎮(zhèn)痛效果的拮抗率和拮抗維持時間長短來觀察鹽酸噻吩諾啡微球的藥效。鹽酸噻吩諾啡微球A劑量組

10、有效拮抗時間為15天,B劑量組有效拮抗時間為21天,C劑量組和D劑量組有效拮抗時間均為28天。從四個劑量的拮抗率曲線中可以發(fā)現,鹽酸噻吩諾啡微球的有效拮抗率作用隨劑量的增大而增強呈劑量依賴關系。
　　以大鼠作為模型動物,采用LC/MS/MS法測定血漿中噻吩諾啡的濃度。通過血漿藥物濃度的測定來評價微球在體內的緩釋效果。突釋主要表現在注射微球后的第1天,血藥濃度達到峰值(4.79ng·mL-1),第3天以后微球的釋藥速度減慢,血藥濃度

11、和對嗎啡的拮抗作用逐漸降低。第5天后血藥濃度上升并達到平臺期(平均2.47ng·mL-1),與藥效學研究中微球在釋藥中期藥效平穩(wěn)的趨勢吻合。第21天后血藥濃度開始下降,至第28天時,血藥濃度下降至(1.54ng·mL-1)。初步考察了鹽酸噻吩諾啡微球在比格犬體內的血藥濃度,就目前得到的數據結果表明鹽酸噻吩諾啡微球在比格犬體內的釋藥特征與在大鼠體內類似,達到了緩釋的效果。
　　在體內外相關性研究中,通過測定不同時間點微球在注射部位的

12、藥物殘留量,計算微球的體內釋藥百分數。用梯形法計算鹽酸噻吩諾啡微球相應的AUC0→T,通過AUC0→T和AUC0→∞的比值作為體內吸收百分數(Fa)。對體內外數據進行點點對應的相關性評價。體內外相關性研究表明,鹽酸噻吩諾啡微球無論采用直接釋藥法還是透析釋藥法測定的體外釋放度與體內釋藥百分數及體內吸收百分數(Fa)之間都具有顯著的體內外相關性。
　　對體內釋藥曲線進行擬合,結果表明鹽酸噻吩諾啡微球的體內釋藥曲線符合Higuchi方程