1、新基因的表達譜分析是一個重要的推測新基因功能的手段。研究基因表達與否、何時表達、在什么部位表達能為新基因的功能研究提供有用的線索。 1 TDRG/基因在人睪丸組織不同發(fā)育時期的表達分析 在證實了TDRGI基因具有睪丸組織特異性的基礎上，本部分首先運用半定量RT-PCR技術研究了TDRG1基因在人睪丸組織不同發(fā)育時期的表達特征，結果發(fā)現(xiàn)．TDRG1基因在時空表達上具有發(fā)育階段特異性，即在正常胚胎睪丸組織中不表達，至成年期睪

2、丸組織中開始啟動該基因的表達，在成年期該基因表達最強，而在老年睪丸組織中表達明顯減弱。 許多在睪丸中表達的基因經常具有細胞類型特異性或發(fā)育階段特異性，反映了組織在發(fā)育過程中的需求。睪丸不同發(fā)育階段差異表達的基因在某種意義上與睪丸發(fā)育特別是精子發(fā)生過程密切相關。TDRG1 mRNA在睪丸組織中的表達模式具有明顯的發(fā)育階段特異性，提示該基因在睪丸生殖細胞的發(fā)育過程中扮演重要角色，可能參與精子生成的過程。 2 TDRG1基因在

3、睪丸組織生殖細胞中的表達分析 為了進一步明確TDRG1基因在睪丸組織生殖細胞中的表達特點及其可能的功能作用，采用經地高辛標記的TDRG1 mRNA特異的多聚寡核苷酸探針，與人類睪丸組織進行原位雜交。發(fā)現(xiàn)TDRG1 mRNA在精母細胞及精細胞中有明顯表達，而在支持細胞、間質細胞中無表達，具有明顯的生精細胞特異性。隱睪癥患者睪丸組織中TDRG1 mRNA的表達缺失。 精子生成包括連續(xù)的有絲分裂、減數(shù)分裂和減數(shù)分裂后階段。其中

4、精原細胞處于減數(shù)分裂前階段，精母細胞處于減數(shù)分裂開始階段，而精細胞處于減數(shù)分裂后階段。TDRG1 mRNA在人睪丸曲細精管中生精細胞特異性表達的特點表明，該基因在精子生成的不同階段存在差異表達，它可能參與控制男性正常精子形成的開始階段，并在減數(shù)分裂后期精子的發(fā)育過程中起作用。 小結：本研究運用數(shù)據(jù)庫消減雜交方法這一新策略結合實驗手段成功克隆了一個人類睪丸生精細胞相關的新基因TDRG1，并采用Northernblot、半定量RT-