姜黃素對ABCA1轉(zhuǎn)運體表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:ABCAl轉(zhuǎn)運體是ATP結(jié)合的盒式膜轉(zhuǎn)運體超家族的成員之一,在促進細胞內(nèi)游離膽固醇和磷脂的流出以及膽固醇的逆轉(zhuǎn)運和HDL生成的起始步驟中起著重要的作用。其基因的突變會導(dǎo)致脂質(zhì)流出到載脂蛋白這一過程的停止,且在其DNA序列中,存在多個SNP,多數(shù)突變都會對其功能產(chǎn)生影響。我們調(diào)查了中國健康人群和高脂血癥病人中ABCAl轉(zhuǎn)運體V77lM位點的基因突變與高脂血癥發(fā)病之間是否存在相關(guān)性。同時在HepG2細胞中,從mRNA和蛋白兩個水平研究

2、了姜黃素這一傳統(tǒng)中藥對ABCAl轉(zhuǎn)運體表達的影響。 方法:在本研究中,我們檢測了108個中國漢族健康人和190個高脂血癥病人的基因型,采用PCR-PFLP的方法進行檢測。同時培養(yǎng)HepG2細胞,利用semi-quantitative RT-PCR和Western-blotting分別從mRNA和蛋白兩個水平檢測了姜黃素對細胞中ABCAl轉(zhuǎn)運體的表達的影響。 結(jié)果:在中國健康人群中ABCAl V77lM位點的等

3、位基因頻率是29.6%,與白種人之間存在顯著差異P=0.047。與健康志愿者相比,高脂血癥患者的等位基因頻率顯著降低,為10.0%,P<0.001。姜黃素作用于細胞24小時后,8個濃度組(50M、10uM、15uM、20uM、30uM、50uM、80uM、100uM)的ABCAl轉(zhuǎn)運體mRNA表達的相對灰度值分別為0.815±0.041,0.825±0.038,0.850±0.041,0.872±0.074,0.885±0.072,0.

4、810±0.029,0.803±0.026,0.745±0.088,前五個濃度組的基因表達與溶媒對照組0.742±0.051相比具有統(tǒng)計學意義(P<0.05):加藥后24小時,8個濃度組(5gM、10mM、15uM、20uM、30uM、50uM、80uM、100uM)的ABCA1蛋白表達的相對灰度值分別為0.767±0.076,0.792±0.064,0.838±0.051,0.855±0.0538,0.853±0.043,0.742±

5、0.122, 0.722±0.076, 0.672±0.099,與前一組實驗結(jié)果相似,前五個濃度組ABCAl蛋白表達水平與溶媒對照組0.655±0.052相比,其差異同樣具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在對ABCAl轉(zhuǎn)運體mRNA和蛋白表達的相關(guān)性分析顯示,兩者顯著相關(guān),P<0.05。姜黃素可以誘導(dǎo)ABCAl轉(zhuǎn)運體mRNA和蛋白的表達,在劑量為30uM時,產(chǎn)生最大誘導(dǎo)效應(yīng)。 結(jié)論:研究結(jié)果提示 ABCAl V77lM

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