1、目的： 1．研究紫杉醇、5-FU不同聯(lián)合方案對(duì)Her-2陽(yáng)性和Her-2陰性胃癌細(xì)胞體外增殖的影響，確定最佳用藥順序，比較兩種胃癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性差異。 2．研究抗Her-2單克隆抗體Herceptin對(duì)Her-2陽(yáng)性和Her-2陰性胃癌細(xì)胞體外增殖作用的影響，探討其在胃癌生物治療中潛在應(yīng)用價(jià)值。 3．評(píng)價(jià)Herceptin聯(lián)合紫杉醇、5-FU對(duì)Her-2陽(yáng)性和Her-2陰性胃癌細(xì)胞是否存在協(xié)同抗增殖作用，確定

2、最佳用藥順序，為開(kāi)辟胃癌分子靶向治療新途徑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 4．初步探討Herceptin抗胃癌細(xì)胞的機(jī)制。 方法： 1．采用MTT比色法觀察不同濃度紫杉醇、5-FU、Herceptin單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)MGC803、N87細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，并利用中效法則判定兩藥合用的效果。 2．采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)紫杉醇、5-Fu、Herceptin單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)MGC803、N87細(xì)胞周期分布和凋亡的影響以及Herce

3、ptin對(duì)N87細(xì)胞Her-2表達(dá)的影響。 3．采用Western-blot方法檢測(cè)Herceptin單獨(dú)以及聯(lián)合紫杉醇、5-Fu對(duì)N87細(xì)胞AKT、P-AKT表達(dá)的影響。 結(jié)果： 1．在MGC803和N87細(xì)胞上觀察到紫杉醇聯(lián)合5-Fu最佳方案是先用紫杉醇24h后用5-Fu48h；MGC803細(xì)胞對(duì)紫杉醇、5-Fu聯(lián)合的同一用藥方案敏感性明顯強(qiáng)于N87細(xì)胞。 2．Herceptin單獨(dú)作用，無(wú)論對(duì)MGC

4、803還是N87胃癌細(xì)胞都沒(méi)有觀察到明顯殺傷作用。 3．Herceptin聯(lián)合化療藥(紫杉醇、5-FU)對(duì)。MGC803細(xì)胞沒(méi)有療效提高作用，對(duì)N87細(xì)胞當(dāng)先用化療藥(紫杉醇、5-Fu)，后用Herceptin時(shí)有明顯的療效提高作用。 4．Herceptin作用于N87細(xì)胞48h后明顯下調(diào)了S期細(xì)胞數(shù)，下調(diào)Her-2蛋白的表達(dá)；Herceptin單用或聯(lián)合化療藥(紫杉醇、5-FU)均能不同程度得抑制N87細(xì)胞的P-AKT