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文檔簡介
1、稻曲病是由Villosiclava virens引起的一種水稻穗部病害,在世界范圍內(nèi)造成嚴重的經(jīng)濟損失。本研究利用SNP和RAPD兩種分子標(biāo)記對湖北省不同水稻田的稻曲病菌進行群體遺傳多樣性分析,可明確稻曲菌株與水稻品種、地理環(huán)境的關(guān)系,從而更好的進行農(nóng)業(yè)防治。目前稻曲病主要依靠化學(xué)防治,而DMI類殺菌劑是防治稻曲病的主要化學(xué)藥劑,對稻曲病菌抗DMI類殺菌劑的分子機理進行了研究,可為稻曲病的有效防控提供理論依據(jù)。本研究取得的主要結(jié)果如下:
2、
1.分離自武漢華中農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗田晚秈98和華粳952兩個水稻品種的43個菌株,系統(tǒng)進化樹顯示相同水稻品種的菌株有聚在一起的趨勢,證明了同一個田塊相同水稻品種上的菌株有很大的相似性。另外,在來自湖北省宜昌望家、宜昌窯河、黃岡、陽新、荊州5塊水稻田的110個稻曲菌株中,同一田塊來源的不同菌株幾乎來自不同水稻品種。遺傳分析發(fā)現(xiàn)相同水稻田不同水稻品種上的菌株趨于聚在一起。Nei遺傳多樣性指數(shù)(H)和Shannon信息指數(shù)(I)都顯示
3、了所有菌株間的多態(tài)性比地理種群間的多態(tài)性要高。另外,MEGA5.2計算的種群間的平均遺傳距離(0.006)高于種群內(nèi)的平均遺傳距離(0.0048)。FST值也顯示了大部分種群間具有顯著的遺傳差異。同一田塊中不同水稻品種上的菌株具有較高的相似性,說明了地理因素在稻曲病菌的進化過程中比水稻品種發(fā)揮了更重要的作用。
2.克隆了稻曲病菌DMI類殺菌劑的靶標(biāo)基因VvCYP51。利用紫外誘變技術(shù)獲得了對DMI類殺菌劑戊唑醇抗性的菌株,命名
4、為UV10th。比較野生型菌株與UV10th的VvCYP51基因的核苷酸序列和表達量,發(fā)現(xiàn)一個點突變,使得氨基酸137位由一個酪氨酸變成組氨酸(Y137H),并且在突變體中該基因過量表達?;蜻z傳轉(zhuǎn)化分析發(fā)現(xiàn)含點突變VvCYP51的轉(zhuǎn)化子比野生型的轉(zhuǎn)化子對戊唑醇具有較高的EC50值,而VvCYP51表達量與EC50值沒有相關(guān)性。分子對接與結(jié)合實驗同時證明了野生型VvCYP51蛋白比含點突變Y137H的VvCYP51與戊唑醇有更高的親和力
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