番茄中乙烯信號轉(zhuǎn)錄因子LeERF1和LeERF2調(diào)控機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對番茄中乙烯信號轉(zhuǎn)錄因子LeERF1和LeERF2調(diào)控機制進行了研究。文章通過RT-PCR方法從破色期番茄果實中克隆LeERF1和LeERF2基因，PCR產(chǎn)物被亞克隆到原核表達載體pET-30a上，在大腸桿菌BL21中篩選到含有目的基因的重組質(zhì)粒pET-LeERF1和pET-LeERF2；在大腸桿菌BL21中分別表達了外源蛋白LeERF1和LeERF2，誘導溫度為37℃，誘導劑IPTG濃度為1mmol/L，誘導時間為3h；制備了抗L

2、eERF1和LeERF2多克隆抗體；通過膠體金免疫電鏡定位的方法分析番茄果皮維管組織中LeERF1的亞細胞分布狀況；通過LeERF1蛋白-DNA體外結(jié)合實驗，克隆了長度分別為893bp和734bp的TLBP1和TLBP2兩個基因片斷；采用番茄青霉菌侵染綠熟期、破色期、粉紅期和紅熟期麗春番茄果實。研究表明，LeERF1隨乙烯釋放量的變化而變化，在蛋白水平受乙烯調(diào)控；LeERF1蛋白與編碼幾丁質(zhì)酶LECHI17基因mRNA水平變化趨勢基本一

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