1、StudyonsecondarymetabolitesofhalophilicActinopolysporaspYIM90615AdissertationSubmittedtoYunnanUniversityinfulfillmentoftherequirementfortheawardoftheMaster’SDegreeByShengGaoSupervisedbyAssociateProfessorDrShuKunTangYunna

2、nInstituteofMicrobiologyYunnanUniversityKunming，650091，YunnanPRChinaMay2013摘要摘要放線菌是一類非常重要的具有經(jīng)濟(jì)，醫(yī)學(xué)和工業(yè)應(yīng)用價(jià)值的微生物資源。但是，近年來(lái)從普通環(huán)境來(lái)源的放線菌中分離到已知化合物的重復(fù)率增加以及發(fā)現(xiàn)具有高活性的新天然產(chǎn)物越來(lái)越少，使得人們把研究目標(biāo)投向了極端環(huán)境下的微生物。嗜鹽放線菌是生活在極端高鹽環(huán)境中的特殊放線菌類群，已探測(cè)到它們具有豐富

3、多樣的功能基因。本研究以我們實(shí)驗(yàn)室從新疆鹽湖分離到的嗜鹽放線菌為研究材料，在實(shí)驗(yàn)室前期的工作基礎(chǔ)上，選取具有抗腫瘤細(xì)胞活性和I型PKS基因的嗜鹽放線菌30株。采用3種不同的液體培養(yǎng)基對(duì)這30株嗜鹽放線菌分別進(jìn)行小量發(fā)酵，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行萃取濃縮得到粗提物，結(jié)合多層次化學(xué)多樣性，從中選出10株嗜鹽放線菌以及適合發(fā)酵培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基。將選出來(lái)的10株嗜鹽放線菌分別放大發(fā)酵，對(duì)粗提物進(jìn)行初步的劃段分離純化，基于HPLC和TLC的多層次化學(xué)篩選，再

4、結(jié)合1DNMR數(shù)據(jù)的綜合比較分析后，最終選出活性高且代謝產(chǎn)物穩(wěn)定的多孢放線菌屬的ⅥM90615為目標(biāo)菌株。最后將菌株ⅥM90615擴(kuò)大發(fā)酵150L，采用多種分離純化方法對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化，共得到25個(gè)化合物。對(duì)這25個(gè)化合物做1HNMR，以及部分化合物做13CNMR、MS、DEPT、HSQC、1H_1HCOSY和HMBC等數(shù)據(jù)分析，通過(guò)結(jié)構(gòu)鑒定和數(shù)據(jù)檢索可鑒定出19個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，包括以下幾類：5個(gè)葸醌類、3個(gè)異苯并呋喃類、2個(gè)嘧啶類

5、、2個(gè)腺苷類、1個(gè)對(duì)羥基苯甲醛、1個(gè)對(duì)羥基苯乙酰胺、1個(gè)2苯甲酰胺、1個(gè)3吲哚甲酸、1個(gè)2一吲哚乙胺、1個(gè)脫氧尿嘧啶核苷、1個(gè)環(huán)酪氨酸亮氨酸。其中5個(gè)為新化合物(2個(gè)蒽醌類和3個(gè)異苯并呋喃類)，而蒽醌類和異苯并呋喃類是首次從嗜鹽放線菌中分離到，異苯并呋喃類是首次從放線菌中分離到。研究結(jié)果表明，嗜鹽放線菌具有一些特殊的代謝產(chǎn)物，能產(chǎn)生多種不同類型的新化合物，可作為新天然產(chǎn)物的重要來(lái)源，為將來(lái)新藥物的研發(fā)提供一條新的方向。關(guān)鍵詞：嗜鹽放線菌