番茄青枯病拮抗菌的篩選及其生防機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、由青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的番茄青枯病化學(xué)防治效果差,生物防治具有巨大的潛力。為此,本研究采用室內(nèi)平板抑菌法,從土壤中篩選得到三株高效拮抗菌JK6、F7和Y-2;采用盆栽試驗,研究其對番茄青枯病的防治效果;采用質(zhì)譜和高效液相色譜方法,鑒定發(fā)酵液粗提物中抗菌活性物質(zhì);采用熒光定量PCR法,探究拮抗菌施用后土壤中抗菌功能基因數(shù)量的變化。主要結(jié)果如下:
 ?。?)拮抗菌JK6、F7和Y-2對青枯雷

2、爾氏菌的抑菌圈直徑分別高達34.7、20.3和21.3 mm,且能高效抑制香蕉枯萎病病原菌等多種植物病原菌,其抑菌圈直徑在34.5~45.0 mm之間。通過生理生化試驗和16S rRNA基因序列比對,菌株JK6初步鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株F7和Y-2為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)。
 ?。?)拮抗菌JK6、F7和Y-2顯著降低盆栽

3、番茄青枯病的發(fā)病率,其中JK6的生防效率高達58.6%,并能顯著促進番茄植株的生長;F7和Y-2的生防效率分別達46.0%和55.5%。
 ?。?)采用C18柱過濾和甲醇萃取,結(jié)合質(zhì)譜和高效液相色譜方法分析,菌株JK6、F7和Y-2發(fā)酵液中,均檢測出表面活性素,其含量分別為:64.42、53.09和31.34 mg.L-1。進一步驗證發(fā)酵液甲醇萃取物對青枯雷爾氏菌的抑制效果,其抑菌圈直徑分別高達23、18和19 mm。由此說明,表

4、面活性素是該菌株具有生防潛能的直接證據(jù)。
 ?。?)各菌株均檢測到合成脂肽類抗菌物質(zhì)的關(guān)鍵基因srfAB、fenD、ituA、ituC、ituD和yndJ。為此采用熒光定量PCR分析,進一步表征拮抗菌JK6、F7和Y-2施用后,土壤細菌總DNA中功能基因srfAB、fenD、yndJ的拷貝數(shù)顯著高于對照組。
  綜合以上,芽孢桿菌JK6、F7和Y-2具有多種抑病原菌功能,可有效防治番茄青枯病,其抗菌活性主要成分是表面活性素。

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