1、采用親和層析法，分離純化紅鰭笛鯛血清免疫球蛋白(IgM)。用羊IgG免疫紅鰭笛鯛產(chǎn)生特異性抗體，免疫擴(kuò)散法測(cè)得其血清效價(jià)為1：8，將偶聯(lián)羊IgG的瓊脂糖裝柱純化紅鰭笛鯛血清中的特異性抗體。經(jīng)SDS-PAGE電泳，圖譜顯示二條主區(qū)帶，即重鏈和輕鏈。重、輕鏈分子量分別為80kD和29kD；圖譜中除二條主區(qū)帶外，無(wú)雜蛋白帶，說(shuō)明純化的血清IgM的純度很高。免疫擴(kuò)散法，發(fā)現(xiàn)紅鰭笛鯛血清IgM只與兔抗紅鰭笛鯛血清IgM出現(xiàn)沉淀反應(yīng)；而人IgM只與

2、羊抗人IgM血清發(fā)生沉淀反應(yīng)，這些表明紅鰭笛鯛血清IgM與人IgM之間無(wú)免疫同源性。 收集正常生活下的非免疫紅鰭笛鯛的膽汁和皮膚粘液，比較它們與分離純化的紅鰭笛鯛血清IgM之間的同源性，發(fā)現(xiàn)膽汁和皮肽粘液都與兔抗紅鰭笛鯛血清IgM的抗血清有沉淀反應(yīng)。結(jié)果表明：膽汁和皮膚粘液中存在的IgM的某些理化性質(zhì)同血清中的IgM相似，由此推斷，紅鰭笛鯛的膽汁和皮膚粘液中IgM的來(lái)源可能與血清中IgM具有一定的免疫同源性。 采用單向

3、放射免疫擴(kuò)散法，測(cè)出紅鰭笛鯛未免向．清中TgM的含量達(dá)達(dá)13.5mg／ml，當(dāng)用羊IgG免疫紅鰭笛鯛時(shí)，血清抗體效價(jià)達(dá)到25.8mg／mL。 用溶藻弧菌的滅活全菌苗作為免疫原，分別以1×lO8<'8>cfu／mL，l×10<'9>cfu／mL和9×10<'9>cfu／mL三個(gè)濃度免疫接種紅鰭笛鯛，通過(guò)測(cè)定受免魚(yú)血清中凝集抗體效價(jià)和魚(yú)體攻毒試驗(yàn)，探討了紅鰭笛鯛對(duì)滅活的溶藻弧菌菌苗的免疫應(yīng)答狀況。結(jié)果表明為：①免疫后從第7d車(chē)開(kāi)始，

4、3組免疫魚(yú)血清中都檢測(cè)到抗體。注射疫苗1×10<'8>cfu／mL和1×10<'9>cfu／mL組都在第28d抗體效價(jià)達(dá)到最高，分別為1：98.4和1：135.3；而注射疫苗9×10<'9>cfu／mL組血清抗體效價(jià)升高很快，第2周抗體效價(jià)就達(dá)到最高的水平1：384；直到第6周3組魚(yú)血清抗體效價(jià)仍然保持在較高水平。②在免疫后50天，用濃度為1.0×lO<'9>cfu／mL的溶藻弧菌懸液進(jìn)行攻毒，測(cè)得的免疫保護(hù)率分別為56％、69％、80