1、以油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系681A和轉(zhuǎn)基因雄性不育系trans I為材料,進(jìn)行了以下兩個(gè)方面的研究,其一是利用細(xì)胞學(xué)生物技術(shù)觀察油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系681A和轉(zhuǎn)基因雄性不育系trans I發(fā)生敗育的細(xì)胞學(xué)特征,并比較兩者之間的差異;其二就是通過(guò)田間觀察和人工控制溫度處理,來(lái)探討溫度對(duì)新型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系681A微量花粉的影響.首先,利用石蠟切片及顯微拍照的技術(shù),觀察了這兩個(gè)雄性不育系發(fā)生敗育的細(xì)胞學(xué)特征.主要結(jié)論如下:1.681A的敗育時(shí)期

2、是孢原細(xì)胞期.由于溫度的影響,1.6~2mm大小的花蕾開(kāi)始出現(xiàn)花粉囊的分化,以后各大小的蕾都分化了個(gè)數(shù)不等的花粉囊,一個(gè)花藥可分化出1~4個(gè)花粉囊,可見(jiàn)到自四分體到成熟花粉粒的各階段小孢子.未分化花粉囊的部位都停留在孢原細(xì)胞期,僅僅是一些薄壁細(xì)胞.2.轉(zhuǎn)基因雄性不育系trans I的敗育特點(diǎn)是自四分體時(shí)期開(kāi)始,絨氈層出現(xiàn)增生,與中層細(xì)胞分離脫落,不規(guī)則解體,液泡化等變異特征,從而導(dǎo)致花粉粒完全敗育,表現(xiàn)為花粉粒形狀正常但不能正常染色或花

3、粉壁增厚,不染色;用醋酸洋紅染色后鏡檢發(fā)現(xiàn)所有花粉粒都不染成紅色,呈透明的淡黃色.花藥的其他發(fā)育特征都與正常花藥的發(fā)育特征相同.其次,2002年于湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田摘取六株681A主花序上當(dāng)天開(kāi)的花朵,按開(kāi)花順序分別固定,然后用醋酸洋紅鏡檢,記錄每朵花的單視野花粉量,結(jié)合相應(yīng)日期的日均溫總結(jié)得出:681A表現(xiàn)為低溫可育,高溫不育,屬于低溫可育型;微粉產(chǎn)生的臨界溫度在10℃左右.單視野花粉量與開(kāi)花期的日均溫有著極顯著的相關(guān)性,其中與開(kāi)花前

4、十天的日均溫的相關(guān)系數(shù)最大,同時(shí)也發(fā)現(xiàn)在當(dāng)年自然條件下681A從2mm的蕾到開(kāi)花的生長(zhǎng)時(shí)間也大約是十天,因此推斷產(chǎn)生微粉的關(guān)鍵時(shí)期是當(dāng)花蕾處于2 mm大小的時(shí)期.接著,2003年于SANYO-SGC1700型人工氣候室內(nèi)分別進(jìn)行低溫(10℃/7℃)和高溫(20℃/17℃)處理,當(dāng)主花序出現(xiàn)第一朵花時(shí),摘取3個(gè)主花序鏡檢;然后當(dāng)?shù)谝淮畏种ι献畲蠡ɡ贋?mm時(shí),選取4個(gè)分枝分別按≤2mm,2.1~3mm,3.1~4 mm,4.1~5mm的4