1、小型豬復(fù)合麻醉劑(XFM)及其頡頏劑具有效果確實(shí)、安全、副作用小及使用方便的特點(diǎn)，但其麻醉和催醒機(jī)理尚不完全清楚。隨著對(duì)于細(xì)胞信號(hào)通路的研究不斷深入，尋找明確的藥物作用靶位，探尋關(guān)鍵的作用機(jī)制一直是全麻機(jī)理和催醒機(jī)理研究的重點(diǎn)。而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)里面存在著非常復(fù)雜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，可謂紛繁復(fù)雜。其中，LKB1可以磷酸化諸多保守的下游激酶，就是一個(gè)很好的代表，AMPK家族屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，LKB1通過磷酸化AMPK而激活A(yù)MPK，負(fù)

2、向調(diào)節(jié)mTOR的活性，即LKB1-AMPK-mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路。LKB1/AMPK/mTOR通路可在細(xì)胞增殖、生長、分化等過程中起著中心調(diào)控點(diǎn)的作用，在長時(shí)程調(diào)節(jié)（麻醉時(shí)間長短）及樹突的興奮性調(diào)節(jié)中，LKB1起到了重要作用，特別是參與局部蛋白質(zhì)的合成與神經(jīng)元可塑性密切相關(guān)。這可能就是全麻藥物及其頡頏劑在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮作用的關(guān)鍵靶位點(diǎn)和作用途徑之一。
　　為準(zhǔn)確地了解XFM及其頡頏劑對(duì)中樞高級(jí)神經(jīng)系統(tǒng)生理活動(dòng)的影響，本實(shí)驗(yàn)選取L

3、KB1-AMPK-mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路中的關(guān)鍵蛋白LKB1及其轉(zhuǎn)錄因子為研究對(duì)象，闡明XFM及其頡頏劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)LKB1基因和蛋白的影響，并從分子水平對(duì)XFM及其頡頏劑交互作用機(jī)制進(jìn)行探討，為進(jìn)一步研究LKB1-AMPK-mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　本實(shí)驗(yàn)將90只SD大鼠隨機(jī)分為XFM麻醉組（M組）、小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑組(J組)、XFM與頡頏劑交互組（MJ組）。M組隨機(jī)分為5個(gè)亞組，分別為M1組

4、（腹腔注射XFM10 min后）、M2組（腹腔注射XFM20 min后）、M3組（腹腔注射XFM40 min后）、M4組（腹腔注射XFM60 min后）、C1組（腹腔注射與M組等劑量的生理鹽水）;J組隨機(jī)分為5個(gè)亞組，分別為J1組（腹腔注射頡頏劑10 min后）、J2組（腹腔注射頡頏劑20 min后）、J3組（腹腔注射頡頏劑40 min后）、J4組（腹腔注射頡頏劑60 min后）、C2組（腹腔注射與J組等劑量的生理鹽水）;MJ組隨機(jī)分為

5、4個(gè)亞組，分別為MJ1組（腹腔注射XFM10 min后再腹腔注射頡頏劑10 min后）、MJ2組（腹腔注射XFM10 min后再腹腔注射頡頏劑20 min后）、MJ3組（腹腔注射XFM10 min后再腹腔注射頡頏劑40 min后）、MJ4組（腹腔注射XFM10 min后再腹腔注射頡頏劑60 min后）、C3組（分兩次腹腔注射與MJ組等劑量的生理鹽水）。以上每個(gè)亞組6只。各亞組大鼠到達(dá)預(yù)定時(shí)間點(diǎn)后斷頸處死，取腦，并分離大腦皮層、海馬、小腦

6、、丘腦和腦干部位。采用RT-PCR方法檢測各腦區(qū)中LKB1mRNA的相對(duì)轉(zhuǎn)錄含量，用Western b1ot方法檢測各腦區(qū)中LKB1和磷酸化LKB1(p-LKB1)蛋白的相對(duì)表達(dá)量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)小型豬復(fù)合麻醉劑(XFM)能夠明顯升高大鼠腦內(nèi)大腦皮層、海馬、小腦、丘腦和腦干的LKB1 mRNA相對(duì)轉(zhuǎn)錄量、降低大腦皮層、小腦LKB1和p-LKB1蛋白的相對(duì)表達(dá)量，升高海馬、丘腦和腦干p-LKB1蛋白的相對(duì)表達(dá)量，這些可能

7、是XFM產(chǎn)生麻醉作用的位點(diǎn)。(2)小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑能夠降低大鼠腦內(nèi)大腦皮層、海馬、小腦、丘腦和腦干的LKB1 mRNA相對(duì)轉(zhuǎn)錄量、降低大腦皮層和小腦的LKB1和p-LKB1蛋白的相對(duì)表達(dá)量(3)小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑催醒XFM麻醉的大鼠后，能夠有效完全的逆轉(zhuǎn)大鼠腦內(nèi)小腦和腦干的LKB1 mRNA相對(duì)轉(zhuǎn)錄量、LKB1和p-LKB1蛋白的相對(duì)表達(dá)量，部分逆轉(zhuǎn)丘腦內(nèi)的LKB1 mRNA相對(duì)轉(zhuǎn)錄量、LKB1和p-LKB1蛋白的相對(duì)表達(dá)量，這些