1、DNA錯配修復(fù)(MMR)是DNA損傷修復(fù)的一個重要途徑，主要司職于DNA合成、遺傳重組及損傷過程中發(fā)生的單個及少數(shù)堿基的缺失、插入及錯配的修復(fù)，對維持基因組穩(wěn)定性和DNA復(fù)制保真度至關(guān)重要。水稻基因組計劃數(shù)據(jù)庫中已注釋了一些MMR基因，其中OsMsh6(LOC_Os09g24220)就是一個與擬南芥AtMsh6(At4g02070)同源的錯配修復(fù)基因，但迄今對該基因的功能及其對γ射線處理的反應(yīng)尚缺乏了解。為此，本文研究了OsMsh6基因

2、突變對SSR穩(wěn)定性及同源重組的影響，并分析了OsMsh6基因插入突變體對γ射線處理的反應(yīng)。主要結(jié)果如下:
　　(1) OsMsh6突變對SSR穩(wěn)定性的影響。利用77個SSR標記對3個不同世代的OsMsh6插入突變體及對照日本晴進行了分析，這77個SSR標記包括60個來自核DNA的SSR(Nu-SSR)、10個來自葉綠體DNA的SSR(Cp-SSR)和7個來自線粒體DNA的SSR(Mt-SSR)。在分析的Nu-SSR、Cp-SSR和

3、Mt-SSR中，分別有14、5和2個呈現(xiàn)多態(tài)性，多態(tài)性頻率分別為23.33％、50.0％和28.57％。多態(tài)性呈現(xiàn)的方式既有條帶數(shù)目的變化，也有主帶位置的偏移。不同突變體中出現(xiàn)的SSR多態(tài)性頻率不同，趨勢為NF9010＞ND6011＞NF7784。這些結(jié)果表明OsMsh6基因突變不僅會造成核內(nèi)DNA中SSR的不穩(wěn)定，而且也會引起核外DNA中的SSR變異。該研究確認了OsMsh6基因?qū)S持基因組穩(wěn)定的重要作用，為進一步闡明OsMsh6基因

4、的功能提供了依據(jù)。
　　(2) OsMsh6基因突變對同源重組的影響。通過突變體NF9010、ND6011及其對照日本晴分別與秈稻品種早秈B雜交，建立了3個F2作圖群體。利用第一、三、九、十連鎖群上篩選出的40個多態(tài)性SSR進行連鎖作圖。在ND6011/早秈B和NF9010/早秈B的F2群體中，染色體1、3、9和10上的SSR標記圖距均有所增加，增加幅度在2.0％-32.5％之間，標記間距離增加的程度隨標記所在的染色體和突變體不同

5、而變化。這些結(jié)果證明OsMsh6基因具有限制重組的功能，突變后導(dǎo)致同源重組率的提高。該研究不但證明了OsMsh6基因在同源重組中的作用，而且也為水稻育種中利用該突變體促進野生基因資源的滲入奠定了基礎(chǔ)。
　　(3) OsMsh6突變體對γ射線處理的反應(yīng)效應(yīng)。對OsMsh6突變體和日本晴采用不同劑量的γ射線(75、150、300、450Gy)進行處理，分析了發(fā)芽率、苗高、根長、根數(shù)等生理指標和OsMsh6基因的表達。對生理指標測定的結(jié)

6、果顯示，相同處理劑量下日本晴的各項生理指標均高于突變體，說明突變體對γ射線處理的敏感性升高，特別是當處理劑量達到150Gy及以上時，突變體的敏感性增強表現(xiàn)尤為明顯。但不同突變體的敏感性也有差異，表現(xiàn)趨勢為NF9010＞NF7784＞ND6011。RT-PCR結(jié)果顯示OsMsh6基因的表達水平隨處理劑量的增大而升高，說明OsMsh6基因了參與γ射線處理造成DNA損傷的修復(fù)。這一研究為進一步利用MMR突變體構(gòu)建高效的誘變育種體系提供了依據(jù)。