1、摘要摘要花鰻鱺是降海洄游性魚類，具有很高的營養(yǎng)價值和市場開發(fā)前景，其幼鰻(鰻苗)須從海水遷移到淡水中生長發(fā)育。目前對花鰻鱺滲透壓調節(jié)和免疫應答方面的探索，已經從細胞形態(tài)和病理檢測水平轉移到了分子機制水平的研究。但關于激素受體基因在洄游性魚類鹽度適應調節(jié)方面的研究和熱休克蛋a(ifeashockproteins，HSP)在免疫應答方面的報道還很少。精氨酸催產素受體(Argininevasotocinreceptors，AVTRs)和異亮氨

2、酸催產素受體(Isotocinrexeptor，ITR)屬于G蛋白偶聯受體(Gproteincoupledreceptor，GPCR)，它們與配體結合之后，激活耦合的G蛋白，并啟動多種信號轉導途徑產生多種生物學效應，在滲透調節(jié)過程中扮演著重要角色。此外，HSP常作為分子伴侶識別多肽，抵御不利刺激，發(fā)揮細胞保護功能。本文以花鰻鱺幼鰻為研究材料，初步探究AVTRs，ITR在不同鹽度環(huán)境下的表達變化規(guī)律和HSP感染嗜水氣單胞茵后的表達變化模式

3、。具體研究結果如下：1花鰻鱺AVTRs和ITR基因的克隆、鑒定與表達分析采用RACE技術，首次克隆了花鰻鱺AVTRVla2、AVTRV2和ITR基因的cDNA全長，其中三者全長分別為3049bp、2101bp和2191bp：分別包括1260bp開放閱讀框(ORF)編碼419個氨基酸，1656bp個ORF編碼551個氨基酸以及113lbp個ORF編碼376個氨基酸：5’UTR區(qū)和37UTR區(qū)分別為237bp和1552bp、158bp和28

4、7bp、69bp和1060bp；DNAstar軟件預測它們的分子量分別為47784KD、59884KD和42970KD，等電點分別為8664、8705和9292；氨基酸序列分析結果表明每個受體都含有G蛋白偶聯受體所特有的七次跨膜結構域。通過多重比較和系統進化樹分析，發(fā)現花鰻鱺AVTRVla2、AVTRV2和ITR基因在魚類中高度保守。運用熒光定量PCR技術，檢測花鰻鱺AVTRVla2、AVTRV2和ITR基因在腦、鰓、腸、肝臟、脾、腎臟

5、、肌肉和心臟8種組織中廣泛分布，不同基因間有組織特異性。選取鹽度0、鹽度10(Brackishwater，BW)矛N鹽度25(Seawater，sw)的花鰻鱺腦、鰓、腸三種組織進行分析，結果AVTRVla2、AVTRV2和ITR基因的mRNA均發(fā)生顯著差異表達變化(P005)。通過蛋白質免疫印跡技術，檢測腦組織中AVTRVIa2蛋白的表達量，結果表明它在BW組呈先升高后降低趨勢，SW組顯著下調。此外，在鰓組織中，探究了三個受體基因分別和