生產(chǎn)生物農(nóng)藥的海洋微生物的篩選.pdf_第1頁(yè)
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1、采用化學(xué)藥物防治水產(chǎn)動(dòng)物病害誘導(dǎo)病原菌株產(chǎn)生的耐藥性,以及藥物的殘留問(wèn)題,已經(jīng)逐漸引起人們的關(guān)注。用生物農(nóng)藥替代化學(xué)藥物是解決該問(wèn)題的有效措施之一。本文以浙江沿海的微生物為研究對(duì)象,對(duì)其胞外酶活性、抑菌以及殺蟲(chóng)活性進(jìn)行研究,并以這三種活性為指標(biāo)建立篩選具生物農(nóng)藥活性的菌株的模型,以期為生物農(nóng)藥的研法提供科學(xué)依據(jù)。 在2002年8月-12月間共采集細(xì)菌2314株,放線(xiàn)菌和霉菌50株。對(duì)采集的細(xì)菌進(jìn)行自然、高溫(50℃)、酸性(pH

2、4.5)、高鹽(55‰)四種條件下的處理,對(duì)淀粉酶等四種胞外酶活性進(jìn)行分析,觀察采樣時(shí)間和培養(yǎng)條件對(duì)它的影響并從中篩選出具有強(qiáng)酶活的細(xì)菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在自然條件下,采樣時(shí)間對(duì)細(xì)菌的胞外酶活力有很大影響;在高溫條件下四種酶的活性弱于自然條件,只有極少數(shù)幾個(gè)月強(qiáng)于自然條件;高鹽條件下,酪蛋白酶受其影響較小,其他酶受其影響很大;酸性條件下,膠原蛋白酶受其影響相對(duì)較小,其他酶受其影響很大。此外,通過(guò)對(duì)四種酶比較發(fā)現(xiàn),具有強(qiáng)酪蛋白酶和膠原蛋白酶活力

3、的細(xì)菌比例明顯高于具淀粉酶的,而淀粉酶的略強(qiáng)于酯酶。故具有強(qiáng)酶活的細(xì)菌多在自然條件下篩選。 對(duì)采自不同時(shí)間的細(xì)菌的苯丙氨酸脫氨酶活性研究發(fā)現(xiàn),隨著時(shí)間的推移酶活性呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì),即夏季高、秋冬季低;此外它的變化趨勢(shì)與環(huán)境中的分子氨的含量呈一定的正相關(guān)關(guān)系,此酶活性過(guò)高會(huì)造成環(huán)境中氨量增加而破壞環(huán)境,因此可以將苯丙氨酸脫氨酶作為一個(gè)篩選指標(biāo)。 運(yùn)用SPSS軟件對(duì)四種酶進(jìn)行聚類(lèi)分析,發(fā)現(xiàn)不論外界條件如何變化膠原蛋白酶和

4、酪蛋白酶距離都較接近,而淀粉酶和酯酶一般位于聚類(lèi)的外群。所以?xún)煞N蛋白酶可以任選一種,與淀粉酶和酯酶共同作為篩選酶的模型。但是由于以四種酶為依據(jù)對(duì)細(xì)菌聚類(lèi)分析時(shí)并不依據(jù)酶活性大小分類(lèi),所以不能作為篩選細(xì)菌的模型。而在對(duì)溶血活性的研究中發(fā)現(xiàn)有59株細(xì)菌具有較強(qiáng)活性,所以將這59株菌作為進(jìn)行生物篩選的目的菌。 對(duì)海洋微生物的抑菌和殺蟲(chóng)活性研究發(fā)現(xiàn),利用溶血活性篩選出的59株細(xì)菌中有48株能抑制革蘭氏陰性菌,其中有19株具有強(qiáng)活性;抑制

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