1、水稻OsRhoGAP1和OsRhoGAP2是通過酵母雙雜交篩選到的與水稻Rop蛋白OsRacD相互作用蛋白的編碼基因。前期研究提示，OsRacD可能參與水稻育性調(diào)控。為了研究OsRhoGAP1基因在水稻生長發(fā)育過程中的作用，本研究分析比較了兩種OsRhoGAPs基因的序列特征以及在水稻不同發(fā)育階段的表達特性，進一步分析了OsRhoGAP1的表達與外源植物激素的關系，預測和分析了該基因的啟動子序列，構建了OsRhoGAP1的植物過表達載體

2、，并轉化水稻，篩選陽性轉基因植株，為深入研究OsRhoGAP1的功能及調(diào)控機制奠定基礎。
　　采用生物信息學方法對OsRhoGAP1和OsRhoGAP2進行了序列特征分析和比較。水稻基因組序列數(shù)據(jù)庫的檢索顯示，OsRhoGAP1和OsRhoGAP2分別定位于12號和2號染色體上，兩個基因具有相似的基因結構，都包含5個外顯子和4個內(nèi)含子。OsRhoGAP1的cDNA編碼區(qū)全長1353bp，編碼450個氨基酸和1個終止密碼，OsRho

3、GAP2的cDNA編碼區(qū)全長1320bp的編碼框，編碼439個氨基酸和1個終止密碼。兩個基因編碼蛋白都具有植物RhoGAP/RopGAP蛋白保守的序列特征，即含有RhoGAP和CRIB兩個保守結構域，但在N端和C端序列的差異較大。系統(tǒng)進化分析顯示，OsRhoGAP1與水稻OsRacGAP3相似性最高，OsRhoGAP2與玉米ZmRacGAP2相似性最高。
　　采用實時定量PCR技術分析了OsRhoGAP1和OsRhoGAP2在水稻

4、不同發(fā)育階段的組織表達特性，結果顯示，這兩個基因在水稻不同發(fā)育階段均顯示廣泛表達的特征，并且二者的組織表達特性具有一致性，主要在細胞分裂旺盛的幼葉、幼根、幼穗，以及成熟根中高表達，提示它們可能參與了水稻相關生長、發(fā)育、分化等過程。然而，OsRhoGAP1和OsRhoGAP2在特定發(fā)育階段的表達量存在差異，提示它們可能各自具有獨特的功能。
　　數(shù)據(jù)庫檢索和預測提示，OsRhoGAP1啟動區(qū)含有光、植物激素、非生物脅迫應答的元件。為確

5、定激素對該基因表達的影響，采用實時定量PCR技術分析了6種植物激素對OsRhoGAP1表達的影響，結果顯示，ABA、SA、MeJA使OsRhoGAP1的表達先上調(diào)至3～4.1倍后出現(xiàn)下調(diào)，GA使之出現(xiàn)大幅度上調(diào)，最大幅度為6.4倍，而IAA和6-BA則使之迅速下調(diào)至0.2～0.3倍。說明該基因的表達受到多種植物激素信號的調(diào)控，尤其以GA、IAA和6-BA對該基因表達的影響最為顯著。
　　為了通過轉基因技術鑒定OsRhoGAP1基因