1、目前發(fā)現(xiàn),生物體中的ATP-檸檬酸裂解酶(ACL)發(fā)揮著重要作用,其具有以下四大主要功能:(1)生成胞間乙酰-輔酶A;(2)作為脂肪酸合成的調控酶;(3)提高植物抗逆性;(4)參與了有性生殖的調節(jié)。但與甘蔗ACL相關的基因功能研究在國內外尚未見報道。本研究利用分子生物學技術,研究了SoACLA-1基因功能。主要結果如下:
　　1.克隆SoACLA-1基因。根據(jù)甘蔗SoACLA-1基因(登錄號為JQ292843.1)的序列,在ORF

2、的兩端設計特異引物,通過PCR技術,克隆了甘蔗SoACLA-1基因編碼區(qū)全長1272 bp的cDNA片段。
　　2.構建雙元植物表達載體。將克隆的cDNA片段正向插入PRI101-AN雙子葉植物表達載體,命名為SoACLA-1-PRI101-AN;將克隆好的cDNA片段反方向插入PRI101-ON單子葉植物表達載體,命名為SoACLA-1-PRI101-ON。
　　3.獲得轉基因煙草和轉基因甘蔗。采用農桿菌介導的遺傳轉化法分

3、別將SoACLA-1-PRI101-AN轉化煙草(Nicotiana tabacum L.cv.K346),將SoACLA-1-PRI101-ON轉化甘蔗品種新臺糖22號(ROC22)。通過PCR、Southern雜交檢測,獲得了44株轉基因煙草和21株轉基因甘蔗。
　　4.Real-time RT-PCR表明,轉基因煙草SoACLA-1基因的表達量顯著高于野生型植株,隨著干旱脅迫的增加,該基因表達量呈拋物線狀態(tài)增長;中度干旱脅迫