1、MolecularPhylogeneticResearchofTenthredopsis(Hymenoptera：Tenthredinidae)byLIUMengmengAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofAgricultureForestProtectionCentralSouthUniversityofForestry

2、&Technology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，ERCHINASupervisorProfessorWEIMeicaiMay2014摘要合葉蜂屬(Tenthredopsis0Costa，1859)除少量邊緣種類(lèi)外，大多數(shù)種類(lèi)種間相似性較高，種內(nèi)變異十分復(fù)雜，其分類(lèi)學(xué)問(wèn)題一直是研究的難點(diǎn)，并且合葉蜂屬內(nèi)的系統(tǒng)發(fā)育研究基本處于空白狀態(tài)。因此，本研究借助于分

3、子標(biāo)記對(duì)合葉蜂屬進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析。本文基于線(xiàn)粒體COI、16S基因及核基因ITS2，選取鈍頰葉蜂屬(Aglaostigma)和隱斑葉蜂屬(Lagidina)為外群，采用鄰接法(NJ法)、貝葉斯法(BI法)和最大似然法(ML法)分別構(gòu)建了COl、16S、ITS2及COI&16S&ITS2四個(gè)數(shù)據(jù)集的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，并對(duì)其進(jìn)行了分析，結(jié)果表明：(1)實(shí)驗(yàn)所得線(xiàn)粒體基因COl、16S及核基因ITS2的平均序列長(zhǎng)度分別為845bp、383bp、6

4、94bp，保守位點(diǎn)比例分別為646％、655％、531％，表明三個(gè)基因序列均具有一定的保守性。堿基組成中COI、16S數(shù)據(jù)集的AT含：量分別為708％，796％，均明顯高于GC含量，其中COI基因密碼子第三位AT含量最高，達(dá)914％，此現(xiàn)象與昆蟲(chóng)線(xiàn)粒體基因中高AT含量是一致的，將COI基因序列翻譯為氨基酸后發(fā)現(xiàn)其在密碼子使用頻率上也具有一定的偏向性：。ITS2數(shù)據(jù)集的AT含量為45O％，低于GC含量，不同于昆蟲(chóng)線(xiàn)粒體基因中的高AT含量。

5、(2)COI、16S、ITS2三個(gè)基因數(shù)據(jù)集中轉(zhuǎn)換比顛換值R分別為133、048、O97，不同序列發(fā)生轉(zhuǎn)換與顛換的堿基不同，且三個(gè)序列均存在不同程度的飽和趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)基因數(shù)據(jù)集的轉(zhuǎn)換、顛換與P距離進(jìn)行替換飽和作圖發(fā)現(xiàn)，堿基突變未達(dá)到飽和，因此，這些基因數(shù)據(jù)集可以用于后續(xù)合葉蜂屬的系統(tǒng)發(fā)育分析。(3)分別對(duì)四個(gè)基因數(shù)據(jù)集中合葉蜂屬(除Tenthredopsisexcisa)、Tenthredopsisexcisa、鈍頰葉蜂屬、隱斑葉蜂屬屬

6、內(nèi)及屬間的遺傳P距離進(jìn)行了計(jì)算和統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示：合葉蜂屬內(nèi)部分類(lèi)群間的P距離極小，甚至為0，表明這些類(lèi)群親緣關(guān)系極近，甚至可能為同一類(lèi)群；合葉蜂屬與歐洲種Tenthredopsisexcisa的距離明顯大于合葉蜂屬內(nèi)的平均距離，略小于合葉蜂屬與鈍頰葉蜂屬的P距離，合葉蜂屬與隱斑葉蜂屬的距離最遠(yuǎn)。(4)綜合4個(gè)基因數(shù)據(jù)集的三種建樹(shù)結(jié)果顯示：A歐洲種Tenthredopsisexcisa始終自成一支，與合葉蜂屬內(nèi)其他種類(lèi)的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，表明