1、有毒藍(lán)藻水華對全球水生生態(tài)系統(tǒng)和人類系統(tǒng)具有潛在的風(fēng)險(xiǎn)，其釋放的代謝產(chǎn)物藻毒素具有重要生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。從雄性生殖毒性的角度研究水華水體微囊藻毒素對兩棲動(dòng)物種群衰退的影響具有重要現(xiàn)實(shí)意義。本研究以我國藍(lán)藻水華中典型的微囊藻毒素MCLR為目標(biāo)污染物，以兩棲動(dòng)物黑斑蛙為對象，采用體內(nèi)和體外污染模擬實(shí)驗(yàn)等方法，系統(tǒng)研究低劑量暴露條件下MCLR對兩棲生物黑斑蛙的雄性生殖毒效應(yīng)。
　　體外實(shí)驗(yàn)中將黑斑蛙精巢直接暴露于0，0.1，1，10和100 n

2、mol/L MCLR6小時(shí)，結(jié)果表明:(1)暴露于1-100nmol/L的MCLR的精巢中的精子數(shù)量和精子下降，而精子畸形率卻上升，并且與對照組相比都呈現(xiàn)顯著性差異(p＜0.01);(2)相同劑量的MC-LR誘導(dǎo)活性氧ROS和丙二醛含量增加，與此同時(shí)抗氧化酶（過氧化氫酶和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶）的活性和谷胱甘肽降低含量迅速增加，而抗氧化劑超氧化物歧化酶活性顯著下降，這些結(jié)果表明生殖系統(tǒng)迅速做出氧化應(yīng)激反應(yīng);(3)超微結(jié)構(gòu)觀察到線粒體腫脹，內(nèi)

3、質(zhì)網(wǎng)和高爾基體擴(kuò)張，以及線粒體基質(zhì)顏色，嵴數(shù)目和形態(tài)產(chǎn)生變化;(4)利用RT-PCR觀察到芳香化酶P450和SF-1基因與對照組相比顯著增加(p＜0.01)。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中將黑斑蛙分為6組，其中兩組暴露于0和1μg/L MCLR中0，7，14天，另外剩下的四組暴露于0，0.1，1，10μg/L MCLR中14天。結(jié)果表明:(1)精子活力和精子數(shù)量與暴露時(shí)間和濃度顯著負(fù)相關(guān)。與此相反的是精子畸形率則與兩者呈現(xiàn)正相關(guān);(2)超微結(jié)構(gòu)

4、觀察發(fā)現(xiàn)精子形態(tài)異常，生精細(xì)胞中含有液泡，細(xì)胞分散，細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整，核仁變形，生精支持細(xì)胞中線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，細(xì)胞核變形;(3)活性氧ROS和丙二醛MDA與暴露時(shí)間和濃度呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系，而抗氧化酶如還原型谷胱甘肽和谷胱甘肽過氧化物酶則迅速下降，此結(jié)果表明精巢中的防御系統(tǒng)產(chǎn)生了氧化損傷;(4)長期暴露于MCLR強(qiáng)有力的刺激睪丸中的細(xì)胞色素c釋放，從而誘發(fā)了Bax蛋白，caspase3、8、7蛋白表達(dá)增加(p＜0.01)，同時(shí)抑制了Bcl

5、-2蛋白表達(dá)（p＜0.01）;此外隨著暴露時(shí)間和暴露濃度的增加，削弱了C/EBP同源蛋白的相對表達(dá)水平，增強(qiáng)了GRP78蛋白表達(dá)水平，這些結(jié)果表明MCLR誘導(dǎo)雄性黑斑蛙體內(nèi)睪丸的細(xì)胞凋亡可能通過線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路;(5)隨著長期暴露MCLR的時(shí)間和濃度增加，睪酮含量顯著降低，而雌二醇卻呈現(xiàn)明顯的上升趨勢。同時(shí)，芳香化酶P450蛋白和類固醇因子SF-1蛋白表達(dá)含量顯著增加（＜0.01），此結(jié)果表明青蛙的內(nèi)分泌系統(tǒng)失調(diào)。
　　這些結(jié)果