1、鎘（Cd）是生態(tài)環(huán)境中一種常見的重金屬，在環(huán)境中具有穩(wěn)定、積累和不易清除的特點，環(huán)境中的Cd主要經(jīng)呼吸道和消化道進入體內(nèi)。鎘對哺乳動物的毒性具有多器官性和多組織性，已被國際癌癥研究機構(gòu)歸類為人類致癌物質(zhì)。腎臟是鎘蓄積的主要部位，是急性或慢性鎘暴露的主要靶器官，而且近曲小管是鎘腎毒性的主要損傷部位。自噬是一種高度動態(tài)的多步驟生物學(xué)過程，其負責(zé)將溶酶體中損傷的細胞器、錯誤折疊的蛋白質(zhì)和長壽命大分子的降解和再循環(huán)，其作為細胞保護機制來維持細胞

2、穩(wěn)態(tài)和適應(yīng)不利條件。自噬是一種細胞防御過程，其中胞質(zhì)成分、細胞器和入侵細菌由自噬體轉(zhuǎn)運到溶酶體以進行降解。
　　自噬的失調(diào)已經(jīng)涉及腎臟疾病的發(fā)病機制，如：急性腎損傷和慢性腎臟疾病等。mTOR是一類進化上非常保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，屬于磷脂酰肌醇激酶相關(guān)激酶家族成員?？墒苌L因子、營養(yǎng)物質(zhì)等多種因素的影響，通過使其下游的靶蛋白磷酸化，參與基因轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達，進而影響自噬、凋亡等一系列生物活動。在哺乳動物細胞中，mTOR至少具

3、有兩種復(fù)合物mTORC1和mTORC2，具有不同的底物特異性。mTORC1調(diào)節(jié)p70S6激酶1（S6K1）和真核起始因子4E（eIF4E）結(jié)合蛋白1（4E-BP1）的磷酸化。mTORC2調(diào)節(jié)Akt磷酸化或活性。此外，mTOR是啟動自噬的主要調(diào)節(jié)因子。實驗研究表明，Cd染毒能夠抑制自噬，但是否通過mTOR的活化對Cd染毒所致的大鼠腎小管上皮細胞的自噬起抑制作用尚不明確。本實驗以原代培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細胞為模型，進行鎘染毒以及mTOR抑制劑

4、共孵育處理12h。通過蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)（Western Blot）分析Cd染毒對mTOR及其底物的蛋白水平的表達。采用激光共聚焦顯微技術(shù)和蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)檢測mTOR活化對大鼠腎小管上皮細胞自噬流的影響。同時，又檢測了mTOR活化對溶酶體功能及V-ATP酶的影響。結(jié)果表明：Cd染毒能夠激活大鼠腎小管上皮細胞mTOR，mTORC1和mTORC2兩條通路都發(fā)揮作用。而且mTOR主要是通過mTOR的磷酸化起作用，對mTOR總蛋白沒有影響。

5、與此同時，mTOR活化對大鼠腎小管上皮細胞的自噬流具有抑制作用，阻礙了自噬體與溶酶體的融合。此外， mTOR活化影響了大鼠腎小管上皮細胞溶酶體的功能，具體表現(xiàn)在抑制了溶酶體V-ATP酶的表達，使溶酶體酸性環(huán)境減弱?？傊?，Cd染毒所致的大鼠腎小管上皮細胞mTOR的活化，可通過移位到溶酶體膜上，來抑制溶酶體中V-ATP酶的活性，從而減弱溶酶體的酸性環(huán)境，進而損壞溶酶體的功能，最后抑制了溶酶體與自噬體的融合，在Cd所致的大鼠腎小管上皮細胞中發(fā)