1、日本囊對(duì)蝦Marsupenaeus japonicus(Bate，1888)是我國(guó)沿海重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖蝦類，依據(jù)其頭胸甲側(cè)部斜紋全延伸與否可分為兩種不同形態(tài)的差異體，二者地理分布不同并具較大遺傳分化。以兩類群體為材料，開展相關(guān)育種基礎(chǔ)研究，具重要現(xiàn)實(shí)意義。本文首先研究比較了兩種形態(tài)差異體群體生長(zhǎng)特性，并通過(guò)多元分析確定影響其體質(zhì)量的主要形態(tài)性狀;其次，比較了二者的熱耐受性，并初步探討其耐高溫機(jī)理;同時(shí)，克隆了日本囊對(duì)蝦的HSP60基因并分

2、析其熱激時(shí)空表達(dá)，以期為更好開展日本囊對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)和相關(guān)遺傳育種提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論參考。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境下兩種形態(tài)差異體群體生長(zhǎng)特性研究
　　 對(duì)室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境下兩種形態(tài)差異體F1群體不同性別對(duì)蝦的體長(zhǎng)和體質(zhì)量進(jìn)行跟蹤測(cè)量，研究其生長(zhǎng)特性及其規(guī)律。結(jié)果表明:日本囊對(duì)蝦體長(zhǎng)和體質(zhì)量呈冪函數(shù)關(guān)系，兩群體雌、雄蝦其體長(zhǎng)、頭胸甲長(zhǎng)與體重的擬合參數(shù)b值皆近似為3，呈等速生長(zhǎng)。擬合其von Bertallan

3、ffy生長(zhǎng)方程為:形態(tài)差異體Ⅰ（♀）:Lt=15.932×[1-e-0.0067(t-26.5055)]，Wt=48.798×[1-e-0.0067(t-26.5055)]2.973;形態(tài)差異體Ⅰ（♂）:Lt=13.642×[1-e-0.0091(t-35.0053)]，Wt=30.437×[1-e-00091(t-35.0053)]2.969;形態(tài)差異體Ⅱ（♀）:Lt=13.865×[1-e-00077(t-22.8107)]，Wt=

4、31.449×[1-e-00077(t-22.8107)]3.103;形態(tài)差異體Ⅱ（♂）:Lt=12.094×[1-e-0.0102(t-32.6776)]，Wt=21.470×[1-e-00102(t-32.6776)]3.120。進(jìn)一步分析其極限生長(zhǎng)年齡和生長(zhǎng)拐點(diǎn)日齡得出，雌蝦大于雄蝦，形態(tài)差異體Ⅰ對(duì)蝦大于形態(tài)差異體Ⅱ，表明前者最大體重高于后者而性成熟時(shí)間晚于后者。
　　 2.兩種形態(tài)差異體群體形態(tài)性狀對(duì)體質(zhì)量的影響效果分析

5、
　　 隨機(jī)選取室內(nèi)相同養(yǎng)殖環(huán)境下兩種形態(tài)差異體F1群體對(duì)蝦，分別測(cè)量24項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)和體質(zhì)量(Y)性狀。比較兩群體各形態(tài)性狀與體長(zhǎng)的比例參數(shù)發(fā)現(xiàn)，二者在體形上存在一定差異。相關(guān)分析和通徑分析結(jié)果表明，兩群體對(duì)蝦各形態(tài)性狀與體質(zhì)量的相關(guān)性均達(dá)到極顯著（P＜0.01）水平;形態(tài)差異體Ⅰ群體對(duì)蝦的體長(zhǎng)(X1）、第一腹節(jié)寬(X11)、頭胸甲寬(X10)、第五腹節(jié)長(zhǎng)(X7）、第三腹節(jié)長(zhǎng)(X5）和第六腹節(jié)寬(X16)對(duì)體質(zhì)量直接影響顯著，形

6、態(tài)差異體Ⅱ群體則以體長(zhǎng)(X1）、頭胸甲長(zhǎng)(X2）、第五腹節(jié)寬(X15)和第一腹節(jié)寬(X11）對(duì)體質(zhì)量直接影響顯著;兩群體決定系數(shù)分析結(jié)果與通徑分析結(jié)果一致。經(jīng)顯著性分析，將偏回歸系數(shù)顯著的變量對(duì)體質(zhì)量建立多元回歸方程，形態(tài)差異體Ⅰ:Y=-23.789+1.525X1+5.183X10+10.889X11+5.671X7-4.066X5-4.054X16，形態(tài)差異體Ⅱ:Y=-20.533+1.476X1+4.759X11+1.573X2+

7、6.864X15，兩個(gè)方程的回歸關(guān)系均達(dá)到了極顯著水平(P＜0.01)。
　　 3.日本囊對(duì)蝦HSP60基因cDNA克隆與熱激表達(dá)
　　 基于已知物種HSP60同源保守序列設(shè)計(jì)特異性引物，克隆獲得日本囊對(duì)蝦HSP60 cDNA全序列。序列全長(zhǎng)2376bp，包括5'-UTR80 bp，3'-UTR556bp和ORF1740bp。共編碼579個(gè)氨基酸，推測(cè)其分子量為61.08 kD，等電點(diǎn)(pI)為5.49。氨基酸序列同源比

8、對(duì)結(jié)果顯示具較高的保守性，基于氨基酸序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹亦與傳統(tǒng)物種樹基本吻合。熒光定量PCR研究表明，正常情況下日本囊對(duì)蝦HSP60在血細(xì)胞、肝胰臟、心臟、鰓、胃、腸、肌肉和眼柄中均有表達(dá)，其表達(dá)程度在肝胰臟中最高，胃和眼柄中最低。熱激后HSP60在鰓、心、肝胰臟、胃和肌肉組織中的表達(dá)水平顯著(p＜0.05）上調(diào)。鰓和肝胰腺中HSP60基因在熱激后3h出現(xiàn)峰值，到12h時(shí)回落至正常水平。以上結(jié)果也證實(shí)了HSP60參與對(duì)蝦熱應(yīng)激反應(yīng)并在

9、抵御熱激過(guò)程中具有特殊作用，該基因熱激后的表達(dá)情況或許可作為衡量評(píng)價(jià)對(duì)蝦高溫耐受性能的一項(xiàng)指標(biāo)。
　　 4.兩種形態(tài)差異體群體耐熱性能及其機(jī)理研究
　　 比較兩種形態(tài)差異體群體高溫環(huán)境下生長(zhǎng)與成活，96h亞致死溫度以及兩者在不同溫度下的CTMax值，結(jié)果表明，形態(tài)差異體Ⅱ群體耐高溫性能優(yōu)于形態(tài)差異體Ⅰ群體，并認(rèn)為CTMax是較好的對(duì)蝦熱耐受性能評(píng)價(jià)指標(biāo)。機(jī)理探討分析認(rèn)為，形態(tài)差異體Ⅱ群體較低的耗氧率和窒息點(diǎn)可以更大限度的