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1、白術(shù)(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)屬菊科(Compositae)蒼術(shù)屬(Atractylodes),性溫,味甘、苦,具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎的功效,是著名道地藥材“浙八味”成員之一。主要分布在浙江、安徽、江西、湖南、四川、湖北等地。白術(shù)忌連作,種過(guò)的地需間隔5年以上才能再種,然而,隨著市場(chǎng)對(duì)白術(shù)需求的增加,連作現(xiàn)象在白術(shù)種植基地非常普遍。連作后的白術(shù)極易遭受病害侵襲,病害發(fā)生可導(dǎo)致白術(shù)減產(chǎn)甚至
2、絕收。為了減少損失,當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)通常選擇施用農(nóng)藥化肥解決白術(shù)的病害和生長(zhǎng)問(wèn)題,但是嚴(yán)重影響了藥材的品質(zhì)及其道地性。
本文以浙江省磐安縣園塘林場(chǎng)內(nèi)的連作白術(shù)為研究對(duì)象,調(diào)查了白術(shù)的發(fā)病情況,并分離鑒定了致使病害發(fā)生的病原菌,另外進(jìn)行了白術(shù)土著根際促生菌(PlantGrowth-PromotingRhizobacteria,PGPR)的篩選工作,以期尋找到有效的PGPR菌株。主要研究結(jié)果如下:
(1)白術(shù)真菌病害調(diào)查
3、情況
通過(guò)田間調(diào)查取樣,初步確定了白術(shù)根莖腐爛病和葉斑病2種病害。根莖腐爛病是連作白術(shù)最常見(jiàn)病害之一,發(fā)病后植株葉片逐漸枯萎凋落、根莖開(kāi)始腐爛,直至整株死亡。葉斑病發(fā)病初期葉片出現(xiàn)圓形或不規(guī)則斑點(diǎn),之后病斑逐漸蔓延至整株葉片,影響植株正常的光合作用,而導(dǎo)致白術(shù)死亡。
(2)白術(shù)真菌病害病原菌分離與鑒定
依據(jù)形態(tài)學(xué)觀察及分子鑒定方法,確定白術(shù)根莖腐爛病病原菌為尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysp
4、orum)和半裸鐮刀菌(Fusariumincarnatum),白術(shù)葉斑病病原菌為長(zhǎng)柄鏈格孢菌(Alternarialongipes),A.longipes為首次在白術(shù)上發(fā)現(xiàn)。
(3)白術(shù)土著PGPR的分離與篩選
從根系土壤樣品中共分離純化得到21株細(xì)菌,編號(hào)B1-B21。根據(jù)體外拮抗能力、是否解磷、是否產(chǎn)生長(zhǎng)素(IAA)指標(biāo),篩選PGPR菌株。根據(jù)拮抗能力指標(biāo)篩選到11株具有體外拮抗能力的菌株,分別是B1、
5、B2、B4、B5、B8、B10、B11、B12、B17、B19和B21。其中B11菌株對(duì)病原菌F.oxysporum和F.incarnatum的生長(zhǎng)抑制率最為顯著,對(duì)F.incarnatum最高抑菌率達(dá)70.27%。根據(jù)是否有解磷能力篩選到8株解磷細(xì)菌,分別是B2、B10、B11、B12、B14、B15、B17和B21,其中B15菌株的解磷能力最強(qiáng),黃色透明圈直徑D與菌落直徑d比為2.27。根據(jù)是否產(chǎn)生IAA篩選到15株細(xì)菌,分別是B1
6、、B5、B6、B7、B9、B10、B12、B13、B14、B15、B16、B18、B19、B20和B21,其中B5菌株產(chǎn)IAA濃度為55.951mg/L。
(4)白術(shù)PGPR分子鑒定
測(cè)序結(jié)果顯示21株菌株中,B1菌株為泛菌屬(Pantoeaspp.);B2、B10、B12、B17、B19和B21為芽孢桿菌屬(Bacillusspp.),其中B10菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis),B12
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