1、隨著養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖物種不斷增多，高密度集約化養(yǎng)殖方式得到大面積推廣使用。其密度高、周期短、封閉等特點(diǎn)通過影響?zhàn)B殖水體中氨氮的含量，從而給養(yǎng)殖水體帶來營(yíng)養(yǎng)負(fù)擔(dān)并污染整個(gè)養(yǎng)殖環(huán)境。厭氧氨氧化作用是在厭氧條件下使有毒的氨與亞硝酸鹽直接反應(yīng)生成無(wú)毒的氮?dú)獾倪^程，可以有效的解除養(yǎng)殖水體的氨毒。課題選用hzo基因作為功能性標(biāo)記基因，對(duì)青島城陽(yáng)養(yǎng)殖場(chǎng)夏季和冬季不同養(yǎng)殖品種魚類和蝦類養(yǎng)殖池塘沉積物環(huán)境中厭氧氨氧化細(xì)菌的菌群結(jié)構(gòu)

2、、多樣性和豐度進(jìn)行研究，并結(jié)合環(huán)境因子測(cè)定，分析hzo基因豐度與環(huán)境因子的相關(guān)性關(guān)系，以期了解該養(yǎng)殖區(qū)的厭氧氨氧化細(xì)菌。課題選擇夏季和冬季沉積物共12個(gè)站位，分別構(gòu)建hzo基因克隆文庫(kù)，共篩選得到1210個(gè)克隆，在99％相似度水平上劃分得到39個(gè)OTUs，表明養(yǎng)殖區(qū)沉積物環(huán)境中厭氧氨氧化細(xì)菌的多樣性不高。獲得的hzo基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中序列相似度在87%以上，相似度最高序列環(huán)境主要為東江沉積物和東江水柱以及香港麥坡自然保護(hù)區(qū)沉積物

3、環(huán)境。各站位百分覆蓋率高和稀釋曲線趨于飽和說明所構(gòu)建的基因文庫(kù)能充分代表該環(huán)境厭氧氨氧化細(xì)菌hzo基因信息。多樣性指數(shù)F4站位最高，S3站位和S4站位最低，分析表明F4站位厭氧氨氧化功能物種豐富度高。除F2站位外，養(yǎng)殖池各站位冬季沉積物多樣性指數(shù)均高于相應(yīng)的夏季沉積物。各站位厭氧氨氧化菌群Unifrac聚類分析表明夏季養(yǎng)殖池各站位厭氧氨氧化菌群結(jié)構(gòu)差異相對(duì)較小，聚合在一起，冬季養(yǎng)殖池除F2站位外能很好的聚合在一起，表現(xiàn)出了較明顯的季節(jié)性

4、特征。結(jié)合環(huán)境因子聚類分析結(jié)果，揭示養(yǎng)殖區(qū)厭氧氨氧化菌群結(jié)構(gòu)是沉積物間隙水和沉積物多種因子相互作用的結(jié)果。系統(tǒng)發(fā)育樹分為4個(gè)簇，系統(tǒng)發(fā)育分析表明養(yǎng)殖區(qū)厭氧氨氧化菌群主要?dú)w屬于已鑒定得到的Candidatus Kuenenia、Candidatus Scalindua、Candidatus Jettenia三個(gè)菌屬，各站位在每個(gè)分簇中相對(duì)集中，夏季河流水沉積物中多Candidatus Kuenenia，冬季河流水沉積物中多Candidat

5、us Jettenia，夏季沉淀池中多Candidatus Jettenia，冬季沉淀池中多Candidatus Scalindua，夏季養(yǎng)殖池中多Candidatus Scalindua，冬季養(yǎng)殖池中除F2站位外多Candidatus Jettenia。養(yǎng)殖環(huán)境和季節(jié)等對(duì)環(huán)境中厭氧氨氧化細(xì)菌的菌群結(jié)構(gòu)具有顯著影響。養(yǎng)殖池沉積物厭氧氨氧化細(xì)菌hzo基因拷貝數(shù)在4.73×107copies/g和2.93×109copies/g之間，豐度較