1、油菜在我國(guó)廣泛種植，是重要的油料作物。油菜菌核病是我國(guó)油菜生產(chǎn)上的主要病害，在長(zhǎng)江中下游地區(qū)發(fā)病尤為嚴(yán)重，影響了油菜產(chǎn)量和品質(zhì)的提高。作為油菜菌核病的病原菌，核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）在田間主要以菌核的形式存在，侵染期會(huì)散放子囊孢子隨氣流傳播，顯然防治油菜菌核病有很大難度。由于缺乏高抗品種，農(nóng)藥使用也有諸多問(wèn)題，生物防治逐漸成為研究熱點(diǎn)。這其中盾殼霉因寄主專化、防治效果好等原因受到眾多學(xué)者的青睞。由于核盤

2、菌生活史中大多數(shù)時(shí)間是以菌核這種抗逆結(jié)構(gòu)存活于土壤中，有人證明土壤中的微生物是影響菌核存活的主要因素;而盾殼霉施用后也是以孢子形式在土壤中存活，土壤中的微生物與盾殼霉之間的關(guān)系直接影響盾殼霉寄生菌核的效率。因而研究菌核周圍土壤中的微生物對(duì)于防治油菜菌核病有巨大的理論價(jià)值和實(shí)際意義。本研究主要內(nèi)容包括：
　　 ⑴定義距離菌核表皮3 mm左右的土壤為菌核圍土壤，將遠(yuǎn)離菌核(超過(guò)5cm)的土壤定義為非菌核圍土壤。比較二者微生物種類與數(shù)

3、量的差別，確定“菌核圍效應(yīng)”的存在。分離鑒定菌核圍土壤中可培養(yǎng)的微生物，并研究其與核盤菌、盾殼霉三者間的互作，尋找能夠增強(qiáng)和穩(wěn)定盾殼霉防治效果的新途徑。
　　 ⑵利用T-RFLP指紋圖譜技術(shù)檢測(cè)菌核圍與非菌核圍土壤中細(xì)菌和真菌的種類。通過(guò)對(duì)所有樣品進(jìn)行聚類分析及多樣性分析發(fā)現(xiàn)，第13號(hào)樣品因真菌多樣性顯著高于其他樣品(D=0.91，E=0.92)而被單獨(dú)列為1支。第10、19、22號(hào)樣品中細(xì)菌物種豐度顯著低于其他樣品(D＜0.6

4、7，E＜0.61);第3號(hào)樣品單獨(dú)1支，則是因其物種豐度較高(D=0.94，E=0.82)所致。多元線性回歸分析結(jié)果顯示，土壤樣品中真菌種類變化與取樣時(shí)間、取樣地點(diǎn)（菌核圍/非菌核圍）和取樣深度均無(wú)顯著關(guān)聯(lián)(P＞0.05)，細(xì)菌種類變化僅與取樣深度顯著相關(guān)(P=0.002)，回歸方程為y=11.208+3x。
　　 ⑶通過(guò)為期1年的連續(xù)采樣，發(fā)現(xiàn)各個(gè)深度菌核圍土壤含菌量與非菌核圍土壤含菌量的變化并不完全一致，但在取樣后期，無(wú)論變

5、化趨勢(shì)還是含菌量都趨于一致。各個(gè)深度菌核圍土壤含菌量的變化也不盡相同，表層土壤含菌量變化規(guī)律不明顯，5 cm與10 cm深度菌核圍土壤含菌量的變化較為一致。定義菌核圍與非菌核圍土壤中微生物數(shù)量的比值為菌核圍效應(yīng)值，計(jì)算菌核圍效應(yīng)值發(fā)現(xiàn)菌核圍土壤含菌量高于非菌核圍土壤（菌核圍效應(yīng)值大于1）。
　　 ⑷分離菌核圍土壤中可培養(yǎng)的細(xì)菌和真菌并進(jìn)行鑒定，共得到7屬21種細(xì)菌和7屬12種真菌。細(xì)菌中8種屬假單胞菌，6種屬芽孢桿菌，3種為節(jié)桿

6、菌，黃桿菌屬、金黃桿菌屬、伯克氏菌屬、克雷伯氏菌屬各1種。真菌中5種屬青霉，2種屬脈胞菌，剩余5種為米根霉、黑曲霉、黃白生赤殼菌、綠色木霉和葡萄座腔菌科真菌。
　　 ⑸選取所鑒定的21種細(xì)菌的代表菌株，分析其與核盤菌以及與盾殼霉的拮抗關(guān)系。通過(guò)PDA平板對(duì)峙培養(yǎng)，共得到17株對(duì)核盤菌有拮抗效果的細(xì)菌，有4株拮抗效果顯著，其中a-B2、a-B9屬芽孢桿菌，B4屬假單胞菌，B11屬節(jié)桿菌。共得到15株對(duì)盾殼霉菌絲生長(zhǎng)有抑制效果的細(xì)菌