抗鐮刀菌芽孢桿菌的分離、篩選、鑒定及其抗菌機(jī)理初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究針對(duì)長(zhǎng)期以來(lái)困擾國(guó)內(nèi)外植物真菌性病害防治的突出問(wèn)題,即防治效果、環(huán)境友好、食品安全和經(jīng)濟(jì)實(shí)用的矛盾,從自然仿生的角度和生物防治基本原理出發(fā),設(shè)計(jì)和實(shí)施了從省內(nèi)不同地區(qū)和主要作物生長(zhǎng)環(huán)境中廣泛取樣,并以危害普遍且嚴(yán)重的鐮刀菌病的常見(jiàn)病原菌為指示菌,通過(guò)一系列分離、篩選和鑒定工作,得到若干有價(jià)值的芽孢桿菌菌株,從中選出2株綜合抗病力表現(xiàn)優(yōu)良的芽孢桿菌strain5-1和strain36-3,并對(duì)其中1株(strain5-1)的抗病機(jī)理

2、進(jìn)行了初步研究,為進(jìn)一步的研究和利用打下良好的基礎(chǔ)。本研究主要得到了以下幾方面的結(jié)果:
   1在各種作物生長(zhǎng)的內(nèi)外環(huán)境中普遍存在各種能夠抑制植物病原鐮刀菌的芽孢桿菌,通過(guò)適當(dāng)?shù)姆蛛x篩選方法可以得到有應(yīng)用前景的植物病原鐮刀菌生防芽孢菌株。
   2從土壤樣本中分離得到芽孢桿菌幾率遠(yuǎn)高于從活體樣本分離的幾率,但從活體樣本篩得抗病原菌芽孢桿菌的幾率顯著高于土壤樣本的。
   3通過(guò)抑菌圈、抑菌率和抗菌譜試驗(yàn),并綜合這

3、幾方面的表現(xiàn),可以篩選出抑菌效果顯著、抗菌譜廣的芽孢桿菌菌株。
   4復(fù)篩入選菌株strain5-1和strain36-3經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗(yàn),初步鑒定為地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)和短小芽孢桿菌(B.pumilus)。16srDNA序列分析結(jié)果顯示,strain5-1與地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)處于同支相鄰,且相似性為100%;strain36-3與短小芽孢桿菌(B.pumilu

4、s)處于同支相鄰,且相似性為99%。此試驗(yàn)結(jié)果與形態(tài)和生理生化試驗(yàn)相一致。
   5菌株組合試驗(yàn)結(jié)果表明,入選菌株strain5-1,strain36-3及其菌株組合的總抑菌力均高于對(duì)照Bacillussubtilis;菌株組合的總抑菌力又高于單菌株;但從對(duì)單一指示菌的抑菌力來(lái)看,排在前兩位的是單菌株strain5-1。
   6等濃度處理盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,單菌株strain5-1處理組和菌株組合(strain5-1+s

5、train36-3)處理組對(duì)棉花枯萎病都具有顯著的防治效果,分別為30.8%和29.2%。菌株組合有一定互補(bǔ)優(yōu)勢(shì)效應(yīng)。
   7strain5-1抑菌機(jī)理:①通過(guò)向細(xì)胞外分泌可溶性拮抗活性物質(zhì)是其主要抑菌方式。②抑菌物質(zhì)導(dǎo)致病原菌菌絲分支變短、粗縮、斷裂、消解和泡囊化現(xiàn)象,菌絲體正常生長(zhǎng)受到阻礙,菌絲結(jié)構(gòu)遭到破壞。③抑菌活性物質(zhì)對(duì)100℃以上高溫敏感,對(duì)100℃以下尤其80℃以下的溫度有比較強(qiáng)的耐受性;拮抗活性物質(zhì)對(duì)酸堿度變化比

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