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![中國荷斯坦奶牛HSP70-1基因多態(tài)性與耐熱性能相關(guān)性分析.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/e6ac85ce-e2d4-4f63-9a61-6c725a3a2c98/e6ac85ce-e2d4-4f63-9a61-6c725a3a2c981.gif)
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文檔簡介
1、熱應(yīng)激對奶牛的健康造成巨大傷害,并且降低奶牛生產(chǎn)性能,給生產(chǎn)帶來嚴(yán)重?fù)p失。熱應(yīng)激蛋白70(HSP70)作為分子伴侶,在奶牛發(fā)生熱應(yīng)激時能保護(hù)機體免受或減輕傷害。本文以溫濕指數(shù)(THI)作為參照指標(biāo),比較中國荷斯坦奶牛熱應(yīng)激期和非熱應(yīng)激期生理常數(shù)、血液生化指標(biāo)及生產(chǎn)性能變化。采用PCR-SSCP檢測HSP70-1基因單核苷酸多態(tài)性,使用Western-blot方法檢測奶牛熱應(yīng)激時淋巴細(xì)胞HSP70蛋白表達(dá)水平。通過SPSS軟件對SNPs與
2、HSP70表達(dá)水平、生理常數(shù)、血清生化指標(biāo)及生產(chǎn)性能進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。
實驗一。從福建長富某牛場核心群隨機選擇458頭中國荷斯坦泌乳牛進(jìn)行實驗,分別于非熱應(yīng)激期(2013年11月至2014年1月)和熱應(yīng)激期(2014年7月至9月)期間,測定牛舍溫濕指數(shù)(THI)、奶牛生理常數(shù)、血清生化指標(biāo)及生產(chǎn)性能。結(jié)果表明:處于中度熱應(yīng)激時,奶牛直腸溫顯著升高(P<0.05),呼吸頻率極顯著加快(P<0.01);血清T4和Cor濃度分別下降23
3、.80%(P<0.01)和36.20%(P<0.01),血清T3和INS濃度下降,但差異均不顯著(P>0.05);血清Glu下降25.50%(P<0.01),血清BUN濃度升高32.14%(P<0.01),血清TG濃度沒有顯著變化;產(chǎn)奶量、乳蛋白率和乳脂率分別下降了17.75%(P<0.05)、5%(P<0.05)和23%(P<0.01)。
實驗二。采用PCR-SSCP方法,檢測458頭處于泌乳期中國荷斯坦奶牛的HSP70-1
4、基因單核苷酸多態(tài)性,與耐性能進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。根據(jù)CNKI登錄號為AY149619的HSP70-1基因,使用primer5.0設(shè)計12對引物。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在HSP70-1基因1112位點發(fā)生了C-A突變,有AA、AB及BB3種基因型;3390位點發(fā)生T-C突變,有CC、CD及DD3種基因型;4583位點發(fā)生T-C突變,有EE和EF2種基因型;5886位點A堿基缺失,有HH和HI2種基因型。采用Western-blot結(jié)合光密度分析檢測奶牛HS
5、P70表達(dá)水平。使用SPSS軟件建立一般線性模型,對SNPs與生理常數(shù)、血清生化指標(biāo)、HSP70表達(dá)水平及生產(chǎn)性能進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明:C1112A位點與HSP70表達(dá)水平、直腸溫度、產(chǎn)奶量、體細(xì)胞數(shù)顯著相關(guān)。其中:AB及AA型個體直腸溫度顯著低于BB型個體(P<0.05);AB型個體血清T3濃度顯著低于AA和BB個體(P<0.05),T4濃度顯著低于BB個體(P<0.05),低于AA個體,但差異不顯著(P>0.05);AB型個體HS
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