1、百合是世界著名的球根花卉，具有自然休眠特性。百合鱗莖休眠的研究目前主要集中在低溫解除休眠過程中的形態(tài)變化和生理生化變化方面，而分子水平的研究尚是空白。本研究以麝香百合(Lilium longiflorum)為試材，構建低溫解除百合鱗莖休眠過程中的抑制性差減cDNA文庫，并通過EST序列分析來預測文庫中差異表達基因的功能，篩選出了若干個可能參與百合鱗莖休眠解除的相關基因，為進一步研究鱗莖休眠機制奠定了基礎。主要研究結果如下：
　　

2、 1.麝香百合鱗莖經(jīng)7℃冷藏49-56d休眠解除；
　　 2.改進的CTAB法提取百合鱗片RNA，將樣品量從0.2g減少到0.1g，β-巰基乙醇的含量從2%提高到4%，有效抑制了內(nèi)源RNase活性及酚類物質的氧化，成功地從百合鱗片中提得高質量的總RNA；
　　 3.利用抑制性差減雜交技術(SSH)構建了正反cDNA文庫。經(jīng)斑點雜交篩選、測序，正庫獲得了177條有效EST片段，130個unigenes。經(jīng)BLASTx和BL

3、ASTn比對發(fā)現(xiàn)92個unigenes有顯著相似性，占unigenes總數(shù)的70.77%，其中63個具已知或推測功能，占unigenes總數(shù)的48.46%，29個比對上但功能未知，加上38個unigenes比對無顯著相似性，總共67個unigenes可能為未經(jīng)報道的新基因，占unigenes總數(shù)的51.54%。同樣反庫獲得了233條有效EST片段，145個unigenes。經(jīng)BLASTx和BLASTn比對發(fā)現(xiàn)120個unigenes有顯

4、著相似性，占unigenes總數(shù)的82.76%，其中86個具已知或推測功能，占unigenes總數(shù)的59.31%，34個比對上但功能未知，加上25個unigenes比對無顯著相似性，總共59個unigenes可能為未經(jīng)報道的新基因，占unigenes總數(shù)的40.69%。
　　 4.休眠的解除是一個復雜的過程，涉及到物質代謝、信號傳導、抗逆、轉錄、能量代謝和蛋白合成等。本實驗篩選到的可能參與低溫解除百合休眠的基因主要有Ca2+結合