1、口岸是物流、人流量較大的地區(qū)，不僅存在疾病傳播的風(fēng)險，還面臨外來新物種入侵的可能。蠅類是口岸重要的醫(yī)學(xué)昆蟲，攜帶的病菌與膿腫創(chuàng)傷、外科感染、胃腸疾病、食物中毒等密切相關(guān)。所以口岸地區(qū)殺蟲消毒、外來生物監(jiān)測顯得十分必要。此前對醫(yī)院分離病原菌耐藥性的研究較多，而對口岸分離病原菌的消毒劑抗性卻鮮有報道。
　　本論文結(jié)合生理生化反應(yīng)測定和16SrRNA序列測定兩種細(xì)菌鑒定方法，對2011年4月在上海浦東機(jī)場口岸捕獲的蠅類體表、體內(nèi)攜帶的病

2、原菌進(jìn)行了分離、鑒定。發(fā)現(xiàn)其中一株為之前國內(nèi)未報道的條件致病菌Wohlfahrtiimonaschitiniclastica，測定了其生理生化反應(yīng)，對其16SrRNA系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)行了分析，并對其基因組序列進(jìn)行了測序。另外，對分離的24株病原菌對消毒劑的抗性進(jìn)行了測定，檢測了攜帶的抗性基因。本研究結(jié)果對口岸蠅類及蠅媒細(xì)菌的監(jiān)測提供了依據(jù)，并對口岸消毒劑的使用有指導(dǎo)意義。
　　一、浦東機(jī)場口岸蠅類攜帶病原菌種類
　　將浦東機(jī)場捕獲

3、的蠅類體表、體內(nèi)細(xì)菌分離培養(yǎng)，單克隆菌株經(jīng)Vitek2Compact微生物自動分析及16SrRNA基因序列比對。結(jié)果在7種蠅體表檢出18種菌，其中致病菌2種，條件致病菌14種，包括1株國內(nèi)未報道的條件致病菌株Wohlfahrtiimonaschitiniclastica;蠅體內(nèi)檢出14種菌，其中致病菌1種，條件致病菌12種;攜帶菌種類最多的是醬麻蠅，其次為亮綠蠅。
　　二、Wohlfahrtiimonaschitiniclasti

4、ca的分離、16SrRNA鑒定及分子系統(tǒng)發(fā)育從大頭金蠅體表分離出一株細(xì)菌(實驗編號為SH04)，對其16SrRNA序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測序，通過與NCBI數(shù)據(jù)庫Blast比對，該菌與Wohlfahrtiimonaschitiniclastica典型菌株S5的16SrRNA相似度為98.86％，W.chitiniclastica曾在阿根廷引起流浪人員暴發(fā)性膿毒癥。用API20NE和Vitek2兩種方法測定了SH04菌株的生理生化反應(yīng)，使用

5、Mega5軟件，Neighbour-joining方法，構(gòu)建16SrRNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹，生理生化反應(yīng)和進(jìn)化樹分析結(jié)果表明，SH04菌株為上海浦東口岸大頭金蠅體表分離到的W.chitiniclastica菌的新記錄。之后，對W.chitiniclasticaSH04菌株的基因組進(jìn)行了測序。
　　三、蠅媒細(xì)菌消毒劑抗性和抗性基因的檢測
　　從上海浦東機(jī)場捕獲蠅類中分離的細(xì)菌中選取4種共24株病原菌，采用肉湯稀釋法，測定了對三