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![禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及抗藥性機(jī)制初探.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/9ec918db-e178-4c6d-aac8-c825322c84ce/9ec918db-e178-4c6d-aac8-c825322c84ce1.gif)
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1、小麥赤霉病是由禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum Schwade)引起的一種世界范圍內(nèi)最重要的病害,也是國內(nèi)外小麥生產(chǎn)上重要防治對(duì)象之一。該病不僅給小麥的產(chǎn)量造成損失,同時(shí)還產(chǎn)生以脫氧雪腐鐮刀菌烯醇為主的真菌毒素,對(duì)人畜都有較大的危害。目前,生產(chǎn)上仍以化學(xué)防治為主。但長(zhǎng)期單一地使用同類藥劑,可能引起病原菌對(duì)藥劑產(chǎn)生抗藥性,導(dǎo)致藥劑防效降低。戊唑醇是一種高效、廣譜、低毒和內(nèi)吸性強(qiáng)的甾醇脫甲基化抑制劑,其作用方式獨(dú)特,對(duì)小
2、麥赤霉病有很好的效果,但尚未大面積推廣應(yīng)用。因此,本試驗(yàn)進(jìn)行了禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇的敏感基線及對(duì)不同作用機(jī)制殺菌劑交互抗藥性、室內(nèi)抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、抗藥性生物學(xué)特性、抗藥性生理學(xué)機(jī)制等方面的研究。主要研究結(jié)果如下:
1.確立禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇的敏感性基線。2009~2010年120株禾谷鐮孢菌來源于河南、山東、河北等地區(qū),采用菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)該120株病原菌進(jìn)行了敏感性測(cè)定。結(jié)果表明:EC50值范圍為0.0072~0.2007
3、μg/mL,最高與最低值相差27.88倍,EC50平均值為(0.1026±0.0454)μg/mL,最小抑制濃度(MIC)大于0.8μg/mL以上。120株禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇的敏感性頻率分布呈連續(xù)性的單峰曲線,因此可視為野生敏感菌株,可把EC50平均值為(0.1026±0.0454)μg/mL作為戊唑醇對(duì)禾谷鐮孢菌病菌田間抗藥性監(jiān)測(cè)的敏感性基線。
2.采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定11株禾谷鐮孢菌敏感菌對(duì)戊唑醇與5種不同作用機(jī)制殺
4、菌劑異菌脲、福美雙、百菌清、苯醚甲環(huán)唑和多菌靈的敏感性以及對(duì)戊唑醇與5種不同作用機(jī)制殺菌劑交互抗藥性研究。結(jié)果表明:戊唑醇和多菌靈對(duì)禾谷鐮孢菌菌絲生長(zhǎng)具有強(qiáng)烈的抑制活性。戊唑醇與5種不同作用機(jī)制殺菌劑的EC50值之間進(jìn)行線性回歸分析表明戊唑醇與上述5種不同作用機(jī)制殺菌劑之間均無交互抗藥性。
3.通過紫外線誘導(dǎo)和藥劑馴化的方法獲得了9株禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇的抗藥性突變體,其抗藥性水平范圍為34.26~186.03,抗藥性突變頻
5、率分別為1.11%和0.91%。按照FAO分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),這些抗藥性突變體的抗藥性水平根據(jù)EC50值的大小可劃分為低、中、高3種類型,分別為2.0~20μg/mL(LR)、20.1~100μg/mL(MR)和>100μg/mL(HR)。在無藥PDA培養(yǎng)基上,將抗藥性突變體菌絲繼代培養(yǎng)17代數(shù)后有5株抗藥性突變體保持高抗藥性水平??顾幮酝蛔凅w生物學(xué)性狀的研究結(jié)果表明:與親本菌株相比,抗藥性突變體在菌絲生長(zhǎng)速率、菌絲干重、致病力、適合度幾個(gè)性狀方
6、面差異不明顯。綜上所述,禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇存在中等或高抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。因此,戊唑醇的連續(xù)使用有利于抗藥群體的發(fā)展,為避免和延緩抗藥性的產(chǎn)生,生產(chǎn)上應(yīng)將其與其他無交互抗藥性的殺菌劑交替使用。
4.比較禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇的抗藥性突變體和親本菌株的生理學(xué)指標(biāo)。結(jié)果表明:親本菌株和抗藥性突變體菌絲生長(zhǎng)受KC1和葡萄糖影響較大,且KC1和葡萄糖在不同濃度處理后所有菌株之間的滲透壓均存在顯著性差異,故得知KC1和葡萄糖均能為禾谷鐮孢菌提供
7、營養(yǎng)和抑制其滲透。高濃度戊唑醇處理能使抗藥性突變體體內(nèi)滲漏出較多的內(nèi)含物,隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)和濃度的提高,其內(nèi)含物滲漏增多。因此這些結(jié)果可能是禾谷鐮孢菌對(duì)戊唑醇產(chǎn)生抗藥性的原因。
5.用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定戊唑醇與百菌清11個(gè)復(fù)配配比混合物的聯(lián)合毒力。結(jié)果表明:1:11混配時(shí),其增效系數(shù)(SR值)最大為84.38。由此可以看出,戊唑醇和百菌清以一定的比例進(jìn)行二元復(fù)配對(duì)禾谷鐮孢菌有很好的抑制作用,在田問合適的使用其復(fù)配制劑,可
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