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![凡納濱對蝦生長相關基因MLC和SEC61γ的克隆和表達分析.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/2259f67f-1184-468f-b722-5110204a53f9/2259f67f-1184-468f-b722-5110204a53f91.gif)
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文檔簡介
1、凡納濱對蝦作為我國重要的對蝦養(yǎng)殖品種,在我國對蝦產(chǎn)業(yè)中扮演著重要角色,但隨著其養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,對蝦的孵化率和幼體成活率降低、抗病能力減弱、病害嚴重等問題日益凸顯出來。利用現(xiàn)代遺傳育種手段培育出具有優(yōu)良經(jīng)濟性狀的養(yǎng)殖品種是解決上述問題的有效途徑,目前迫切需要進行對蝦生長性狀的分子機理的研究。
本研究以凡納濱對蝦肌肉組織為材料,構建了一個肌肉組織全長cDNA文庫,并隨機選取72個克隆進行測序了分析。對文庫質(zhì)量結(jié)果分析,文庫初始庫
2、容為8.50×106 cfu,插入片段在500~4000 bp之間,大部分片段在1000 bp以上。對隨機選取的72個克隆送交測序,整理分析得到37條已有功能注釋的基因序列和18條未知蛋白的核苷酸序列。
另外本實驗將由已構建的差減cDNA文庫中獲得的兩個生長相關基因肌球蛋白輕鏈基因MLC和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜轉(zhuǎn)運通道蛋白基因SEC61γ的兩條片段序列,通過對己構建的全長文庫進行目的基因的篩選獲得了上述兩個基因的全長序列。凡納濱對蝦ML
3、C基因的cDNA全長序列包含一個462 bp的開放閱讀框,推測其編碼的蛋白質(zhì)含有153個氨基酸,預測其分子量為17.5 ku,等電點為4.67。運用熒光定量PCR的方法對MLC基因在凡納濱對蝦中表達情況進行研究,結(jié)果表明MLC基因在凡納濱對蝦的肌肉、心臟、眼柄等8個組織或器官中都有表達,其中在肌肉組織中表達量最高,而最低表達量是肝胰腺中;不同生長期肌肉組織中,表達量最高是45 d日齡的對蝦,表達量最低是10d日齡。
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