小鵝瘟病毒VP3基因疫苗誘導雛鵝細胞免疫和體液免疫的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、將本研究小組構(gòu)建的小鵝瘟病毒VP3基因疫苗以三個劑量(1μg、3μg和6μg)基因槍轟擊、三個劑量(50μg、100μg和200μg)肌肉注射分別免疫28日齡雛鵝,,同時設肌肉注射小鵝瘟弱毒疫苗、空載體pcDNA3.1(+)和生理鹽水為對照。在免疫后的3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、49 d、63 d、77 d、105 d采抗凝血和凝血各1份,133 d、161 d、189 d、217 d采凝血一份。采用淋巴細胞

2、增殖試驗(MTT法)及間接ELISA分別對鵝的細胞免疫和體液免疫進行檢測。結(jié)果如下: 1.免疫鵝外周血T淋巴細胞的轉(zhuǎn)化功能:T淋巴細胞OD值從免疫后第3天起,逐漸輕微下降,14d最低,然后逐漸上升,第35天時達到最大值。肌肉注射21-63d極顯著(P<0.01)、基因槍轟擊14-63d極顯著(P<0.01)、弱毒疫苗免疫14-63d顯著(P<0.05)、空白質(zhì)粒免疫后21-49d顯著(P<0.05)高于生理鹽水對照組;肌肉注射2

3、1-49d、基因槍轟擊21-49d顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于弱毒疫苗對照組;肌肉注射21-63d、基因槍轟擊21-63d極顯著(P<0.01)高于空白質(zhì)粒對照組;肌肉注射200μg顯著或極顯著高于50μg和100μg組;弱毒疫苗免疫后21-63d顯著(P<0.05)高于空白質(zhì)粒對照組;基因槍轟擊1μg、3μg和6μg三個劑量組之間差異不顯著。表現(xiàn)出基因槍轟擊和肌肉注射pcDNA-GPV-VP3均能誘導雛鵝產(chǎn)生良好的

4、細胞免疫應答,其中基因槍轟擊的免疫效率是肌肉注射的50~200倍。 2.雛鵝血清中特異性GPV血清抗體IgG動態(tài)變化:ELISA抗體滴度(以OD值示),肌肉注射和基因槍轟擊從第14天開始高于空白質(zhì)粒和PBS對照組,21d達到最大值,然后逐漸下降。肌肉注射、基因槍轟擊、弱毒疫苗免疫21-217d顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于生理鹽水和空白質(zhì)粒對照鵝;基因槍轟擊6μg極顯著(P<0.01)高于肌肉注射組各劑量;肌肉

5、注射50μg、100μg和200μg三個劑量組之間差異顯著,200μg免疫效果顯著(P<0.05)高于其他兩個劑量組;基因槍轟擊3μg和6μg各劑量組之間差異不顯著,3μg和6μg與1μg之間差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)?;驑屴Z擊6μg組在3-217d極顯著(P<0.01)或顯著(P<0.05)高于弱毒疫苗組,其它各組均在不同時間段顯著(P<0.01)或顯著(P<0.05)高于弱毒疫苗組。不同劑量pcDNA-GPV

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