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文檔簡(jiǎn)介
1、褐飛虱Nilaparvata lugens(St(M)l)屬于同翅目(Homoptera)飛虱科(Delphacidae),其分布廣泛,經(jīng)濟(jì)危害嚴(yán)重,是東南亞水稻種植區(qū)的主要遷飛性害蟲之一。相關(guān)研究表明褐飛虱僅能在我國(guó)少數(shù)地方越冬,境外遷入的褐飛虱種群是造成暴發(fā)的重要原因之一。為做好褐飛虱的預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)和防治工作了解該種害蟲不同地理種群的遺傳結(jié)構(gòu)、探討各種群間的親源關(guān)系十分必要。
本研究采用富集文庫(kù)法篩選出了高多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記,
2、并采用其中5個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記與1個(gè)線粒體基因序列標(biāo)記相結(jié)合的方法,對(duì)采自東南亞10個(gè)不同地區(qū)的褐飛虱進(jìn)行了系統(tǒng)的地理種群結(jié)構(gòu)研究,獲得了如下結(jié)果:
1.采用探針(AG)15、(AC)15通過(guò)磁珠富集法篩選微衛(wèi)星位點(diǎn),實(shí)驗(yàn)中共測(cè)序陽(yáng)性克隆96個(gè),陽(yáng)性克隆產(chǎn)率為80.2%,篩選到了77個(gè)含有簡(jiǎn)單重復(fù)的序列;根據(jù)微衛(wèi)星側(cè)翼保守序列共合成31對(duì)微衛(wèi)星引物,經(jīng)鑒定其中21對(duì)可用,并且有16對(duì)微衛(wèi)星引物具有較好的多態(tài)性,統(tǒng)計(jì)表明該16個(gè)微衛(wèi)星
3、位點(diǎn)以AG/GA為重復(fù)單位的占37.5%,以TC/CT為單位的占56.3%,以GAGT為單位的占6.3%。
2.采用5個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)檢測(cè)了國(guó)內(nèi)外10個(gè)褐飛虱地理種群(每個(gè)種群24個(gè)個(gè)體),同時(shí)采用線粒體COI基因擴(kuò)增了上述褐飛虱地理種群(每個(gè)種群10個(gè)體)。在5個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)中,共檢測(cè)到96個(gè)等位基因,各種群中平均等位基因數(shù)從8.6-11.2不等。平均期望雜合度與平均觀察雜合度分別介于0.7148-0.8172和0.5917-0.
4、7584之間,屬較高水平。多態(tài)信息含量PIC分布于0.5570-0.9227之間,平均多態(tài)信息量為0.7624。哈溫平衡與連鎖不平衡檢測(cè)顯示各地理種群哈溫平衡偏離常數(shù)均發(fā)生了不同程度的偏離,微衛(wèi)星位點(diǎn)間只有一對(duì)(Z107與Z304)位點(diǎn)存在顯著的連鎖不平衡關(guān)系。在線粒體COI基因中,共定義了18個(gè)COI基因單倍型。各單倍型間的遺傳距離范圍在0.0010-0.3000之間,平均遺傳距離為0.0700。核苷酸分歧度分與凈核苷酸分歧度分別分布
5、在0.0005-0.2032和0.0000-0.1590之間。兩種分子標(biāo)記的指標(biāo)參數(shù)都顯示出較好的遺傳多樣性,獲得的數(shù)據(jù)均可用于種群結(jié)構(gòu)分析。
3.基于微衛(wèi)星標(biāo)記和線粒體COI基因序列對(duì)10個(gè)褐飛虱地理種群間遺傳分化指數(shù)FST值與遺傳距離分析表明,騰沖種群與菲律賓種群各自與其它褐飛虱地理種群間都出現(xiàn)了顯著的遺傳分化。以微衛(wèi)星標(biāo)記得到的種群間遺傳分化指數(shù)FST值與遺傳距離分別在0.0015-0.1214和0.0067-0.556
6、8之間,以mtDNA COI基因序列計(jì)算的遺傳分化指數(shù)FST值遺傳距離分別介于0.0000-0.7857和0.0000-0.2030之間。
4.通過(guò)分析基于微衛(wèi)星標(biāo)記遺傳距離數(shù)據(jù)構(gòu)建的UPGMA樹與依據(jù)線粒體標(biāo)記遺傳距離生成的NJ樹得出以下結(jié)論:各地理種群中大冶、文山、龍洲、勐海、南靖、海南、越南、泰國(guó)8個(gè)種群之間遺傳距離較小,遺傳分化不顯著、親源關(guān)系較近,聚為一個(gè)大類群。騰沖種群與其它地理種群間的遺傳距離較大、基因交流較少、
7、親源關(guān)系較遠(yuǎn)聚為一個(gè)類群。菲律賓種群與除騰沖種群外的地理種群間存在一定的遺傳分化,但不顯著,單獨(dú)聚為一個(gè)類群。從以上結(jié)論可以推斷越南北部和越南南部勻可以為國(guó)內(nèi)稻區(qū)提供蟲源,與前人研究結(jié)果一致;前人認(rèn)為泰國(guó)蟲源對(duì)我國(guó)影響較小,但本文的結(jié)果表明此部分蟲源對(duì)我國(guó)的影響不可忽視;本文的結(jié)果還表明菲律賓蟲源可影響我國(guó),但在程度上遠(yuǎn)不及中南半島蟲源;值得注意的是,云南西部的蟲源與其它東南亞種群皆存在明顯的遺傳差異,因此可把云南西部及云南西部以西的區(qū)
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