1、果蔬從采后運(yùn)輸、貯藏到消費(fèi)者手中的整個(gè)過程中都不可避免地受到不同程度的機(jī)械損傷，機(jī)械損傷破壞了果實(shí)天然的組織結(jié)構(gòu)，引起活性氧的代謝失去平衡，對(duì)果蔬組織產(chǎn)生毒害現(xiàn)象。當(dāng)果蔬體內(nèi)大量活性氧積累時(shí)，抗氧化系統(tǒng)的一系列酶類隨即被激活，以清除活性氧為目的，以清除和減少細(xì)胞膜的氧化傷害。而活性氧是許多生物過程包括細(xì)胞生長，細(xì)胞周期、細(xì)胞程序化死亡、激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞應(yīng)答過程中的重要物質(zhì)。
　　 植物受到機(jī)械損傷時(shí)，植物體內(nèi)的茉莉酸及其衍生物

2、的含量顯著增加，而增加的茉莉酸又誘導(dǎo)PLD及PLA的表達(dá)，進(jìn)而激活JA合成過程中的一系列酶，在這些酶中，PLD，LOX和AOS是三個(gè)及其重要的水解或合成酶，因此編碼這三種酶的基因在轉(zhuǎn)錄水平上的變化對(duì)植物體內(nèi)JA的含量起著重要的調(diào)控作用。
　　 我們的研究表明，機(jī)械損傷使黃瓜果實(shí)中POD和APX的活性明顯上升，而SOD和CAT雖然在機(jī)械損傷后有所上升，但上升幅度不明顯，而四種酶的變化趨勢都是先上升后下降；SA對(duì)四種酶的活性都有一定

3、程度的抑制作用；乙烯在損傷后一定時(shí)間內(nèi)對(duì)POD和APX的活性有一定的促進(jìn)作用，損傷后內(nèi)對(duì)CAT的活性幾乎沒有影響，而對(duì)SOD的活性則有較強(qiáng)烈的抑制作用；MeJA對(duì)損傷后黃瓜果實(shí)中的SOD、POD在損傷后的前幾個(gè)小時(shí)有微弱的抑制作用，而對(duì)CAT、APX的活性則幾乎沒有影響。
　　 我們用同源克隆技術(shù)克隆出黃瓜PLD基因的全長。黃瓜PLD基因cDNA全長為2499 bp，其最大編碼框?yàn)?427 bp，其DNA全長為3754 bp，其

4、中含2個(gè)內(nèi)含子；可能編碼含有808個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，氨基酸序列具有PLD特有的C2結(jié)構(gòu)域；與其它物種PLD同源基因氨基酸序列的比較和構(gòu)建的分子進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)，黃瓜PLD基因?qū)儆赑LD基因家族的α亞家族。
　　 我們的半定量和實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)，機(jī)械損傷后的黃瓜果實(shí)中CsPLDα、LOX、AOS基因的表達(dá)量都有一定程度的上調(diào)，SA對(duì)損傷后的黃瓜果實(shí)中CsPLDα基因和LOX基因的表達(dá)都有微弱的抑制作用，而對(duì)AOS基因的表達(dá)有明

5、顯的抑制作用；乙烯利前處理的損傷黃瓜中CsPLDα基因和LOX基因的表達(dá)有明顯的上調(diào)作用，而對(duì)AOS基因的表達(dá)則沒有明顯的影響；MeJA對(duì)損傷后黃瓜果實(shí)中CsPLDα基因和AOS基因的表達(dá)量都有明顯的促進(jìn)作用，而對(duì)LOX基因的表達(dá)則有明顯的抑制作用。
　　 包括生物脅迫因子如病原體、昆蟲、雜草等，物理脅迫因子如低氧、低溫、干旱、物理損傷、機(jī)械脅迫等，化學(xué)脅迫因子如鹽、金屬離子、營養(yǎng)元素等各種不良環(huán)境因子都能引起植物細(xì)胞的程序性死

6、亡。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，2℃低溫處理9天后，黃瓜果實(shí)的乙烯釋放量、呼吸速率、電導(dǎo)率明顯上升，硬度下降，細(xì)胞核變形，染色質(zhì)開始降解，DNA降解明顯，20℃放置2天后乙烯釋放量、呼吸速率、電導(dǎo)率上升更加明顯，硬度快速下降，DNA降解更加明顯，大多數(shù)細(xì)胞的細(xì)胞核降解，形成沒有細(xì)胞核的空腔，細(xì)胞的程序性死亡特征更加明顯；而1-MCP和EGTA處理后的黃瓜果實(shí)乙烯釋放量、呼吸速率、電導(dǎo)率明顯比對(duì)照低，硬度下降幅度較小，顏色變化較小，細(xì)胞核變形數(shù)量