1、碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：10023S2009475新型疫苗鋅佐劑的制法優(yōu)化及ATP與鋁、鋅復(fù)合佐劑免疫增強(qiáng)效果研究Preparationofnewvaccinesadjuvantzinchydroxideandtheimmune—enhancingeffectoftheATPaluminum，theATPzinccompoundadjuvant所院：醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所姓名：張浩指導(dǎo)教師：胡凝珠主任技師導(dǎo)師小組：胡云章研究員學(xué)科專業(yè)：生

2、物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向：新型疫苗與疫苗佐劑完成日期：二O一二年三月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文摘要疫苗佐劑的發(fā)展直接影響到新型疫苗的開發(fā)及應(yīng)用，為了開發(fā)出更安全、高效、經(jīng)濟(jì)以及更具有靶向性的佐劑，國內(nèi)外研究人員進(jìn)行了大量的研究。目前，鋁佐劑仍然是唯一在世界范圍內(nèi)被批準(zhǔn)用于人用疫苗的佐劑，它主要依賴儲(chǔ)存庫效應(yīng)和免疫刺激效應(yīng)的作用機(jī)制，能夠顯著提高疫苗在體內(nèi)的效果，經(jīng)過了幾十年的應(yīng)用，雖然出現(xiàn)部分輕微過敏反應(yīng)，但總體來說其安

3、全性和有效性均得到了證實(shí)。鋅是人體必需微量元素之一，人體生長發(fā)育離不開鋅，體內(nèi)鋅水平的高低會(huì)對神經(jīng)、生殖和免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響。利用鋅與機(jī)體免疫系統(tǒng)之間的復(fù)雜關(guān)系，鋅療法被越來越廣泛地應(yīng)用于一些疾病的治療中。氫氧化鋅與氫氧化鋁理化性質(zhì)相近，在一定條件下，二者均能以穩(wěn)定的膠體溶液形式存在，由于鋁佐劑在臨床應(yīng)用中取得了良好的效果，因此將氫氧化鋅作為疫苗佐劑進(jìn)行的研究也非常具有潛力，在前期研究中，也初步證實(shí)了氫氧化鋅佐劑的安全性和有效性。在本研究

4、中，參照鋁佐劑的制備方法，首先將可溶性鋅鹽葡萄糖酸鋅作為研究對象，利用其與低濃度氫氧化鈉溶液發(fā)生反應(yīng)，制備出性質(zhì)穩(wěn)定質(zhì)地均勻的氫氧化鋅膠體溶液，之后再針對疫苗佐劑的要求對其理化性質(zhì)進(jìn)行改進(jìn)，最終制得可以作為疫苗佐劑使用的氫氧化鋅膠體溶液。三磷酸腺苷二鈉(ATP)是一種輔酶，有改善機(jī)體代謝的作用，同時(shí)又是體內(nèi)能量的主要來源。ATP能在某些免疫反應(yīng)中扮演重要角色，實(shí)驗(yàn)表明，ATP在與MgCl2復(fù)合使用后，可以對體內(nèi)IgG、IgA、IgM表達(dá)

5、水平產(chǎn)生一定的影響，同時(shí)，ATP是體內(nèi)一類重要的內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)因子，在缺氧、組織損傷、病變發(fā)生時(shí)，多會(huì)伴隨周圍組織體液中ATP水平的變化，利用這一特點(diǎn)，改變體內(nèi)ATP的水平在一定條件下也能有效激活免疫系統(tǒng)，并影響其效應(yīng)過程。因此，ATP也作為一類潛在疫苗佐劑得到進(jìn)一步的開發(fā)和研究。復(fù)合佐劑是近年來佐劑研究的新熱點(diǎn)，由于一些疫苗佐劑單獨(dú)作用效果并不理想，而將多種疫苗佐劑復(fù)合使用以后卻能達(dá)到讓人滿意的效果，因此關(guān)于復(fù)合佐劑的研究也不斷深入。

6、本研究中，分別使用已經(jīng)得到廣泛運(yùn)用的鋁佐劑以及實(shí)驗(yàn)中制備的氫氧化鋅膠體佐劑，與ATP制備得到復(fù)合佐劑，再迸一步研究復(fù)合佐劑與鋁、鋅佐劑單獨(dú)作用的效果差異。實(shí)驗(yàn)中，以人用狂犬病疫苗作為抗原，分別設(shè)置不添加佐劑的抗原對照組、僅添加鋁、鋅佐劑的單獨(dú)佐劑組和分別添加了ATP氫氧化鋁佐劑和ATP氫氧化鋅佐劑的復(fù)合佐劑組，對ICR小鼠進(jìn)行免疫，在初次免疫后不同時(shí)間段通過問接ELISA法檢測小鼠血清中抗狂犬病病毒IgG的滴度進(jìn)行免疫效果評(píng)價(jià)。體液免疫